Earticle

꽃송이버섯은 우리나라를 비롯하여 일본, 중국, 북아메 리카, 유럽, 호주 등 전세계적으로 분포하고 있다. 특히, 이 버섯은 북반구의 온대지역에서 소나무속에서 널리 분 포하는 것으로 알려져 있다. 이 버섯은 너비가 70 cm까지 자라고 자실체 생중량이 6kg까지 크게도 자란다 (Schmidt, 2006). 또한 김 등(1990)에 따르면, 꽃송이버 섯에 의한 낙엽송의 심재부후목은 직경이 28∼32 cm, 부 후근단면적은 47.3∼74.4%, 부후가 진전된 높이는 1.2∼ 5.5 m 까지 달하였고, 전체부피의 27.2%까지 피해를 받 는 것으로 제시하고 있어 이 버섯에 의한 낙엽송 심재부후 의 심각성을 알 수 있다. 꽃송이버섯은 1997년에 일본에서 처음 재배되기 시작 하였다. 특히, 이 버섯은 다른 버섯에 비해 베타글루칸 함 량이 높은 것으로 알려져 더욱 세간의 관심을 모으게 되었 다(Ohno 등, 2000). 최근에는 국내에서도 몇몇 업체에서 버섯재배가 상업화되어 가고 있으나, 이 버섯에 대한 기본 적인 생태조사는 거의 되어 있지 은 상태이다. 따라서 본 연구는 우리나라 남부지방에 위치한 전남 구례지역에서 꽃송이버섯이 자생하는 기주식물의 특성과 발생환경을 보다 체계적으로 접근하여 꽃송이버섯 자생지의 입지조 건을 분석하였다.

To elucidate optimum environmental condition for artificial cultivation of Grifola frondosa, light condition and CO2 concentration have been examined. First, the effects of light quality(blue, green, white) and light intensity(200, 500, 800, 1200 lux) on primordia formation, fruit body yield and morphological properties of Grifola frondosa in bag culture method were tested. Among different color fluorescents, white light(400∼620 nm) had a high mushroom yield(242 g) and a shorter cultivation period(52 days) In particular, morphological properties of G. frondosa using blue light(400∼560 nm) was obtained a wide and deep colored pileus. We also investigated that the appropriate light intensity for production of G. frondosa. The experimental results indicated that 500 lux light was the most effective on mushroom production, whereas, primordia formation was effective at 200 lux. In summary, we propose that the optimal light condition for the bag culture of G. frondosa is white source of fluorescent light and 500lux of light intensity. Second, G. frondosa were cultivated at four CO2 level, 500, 800, 1000, and 1500 ppm after spawning. Comparison in production of fruit body in G. frondosa better result were obtained at lower CO2 levels below 800 ppm. The higher ratio of primordia formation, faster time of primordia initiation and days to harvest(57 days), higher yields and quality of fruit body at lower CO2 levels below 800 ppm than higher that over 1000 ppm, whereas shape of fruit body at higher CO2 levels over 1000 ppm were showed abnormal and lower quality.

흰목이버섯 균주와 공생균을 수집하고 ITS 5.8S rDNA sequencing을 하여 유전자 서열을 분석하였다. Gene Bank Data homology search 결과 분리된 균의 rDNA 서 열이 이 Tremella fuciformis AF042409의 rDNA 서열 과 99% 일치하는 것으로 확인되었다. 그리고 함께 분리 된 공생균은 같은 방법으로 Annulohhypoxylon stygium 으로 확인하였다. 분리된 T. fuciformis KG 103과 A. stygium KG 201 균주는 PD배지에서 각각 14 ㎜/14 days과 85 ㎜/14 days의 균사생육을 나타내었다. T. fuciformis KG 103 균주의 생육최적온도는 25℃ (14mm/14days) 이었으며, 35℃이상 고온과 15 이하 저 온에서 균사 생장이 억제되었다. A. stygium KG 201은 흰목이버섯균과 유사한 최적온도를 나타내었다. T. fuciformis KG 103 균의 생육 최적 pH는 5.0이었으며, A. stygium KG 201도 pH 5.0에서 생육이 가장 왕성하였다. 흰목이버섯 종균용 최적 배지로 참나무톱밥 77.5%, 미 강 20%, 석고 1.5%, 황백당 1% 가 선정되었다. T. fuciformis KG 103과 A. stygium KG 201혼합 종균을 제조하고 흰목이버섯 자실체생산을 위한 병속재배 방법 을 확립하였다. 콘코브(Corn cob) (77%와 52%)가 사용 한 재료 중 최적의 자실체 성장률을 나타냈으며, 콘코브 함량을 줄일수록 생육이 저조하였다. 면실박과 참나무톱 밥은 단독 사용시 생육이 저조하였고, 콘코브를 첨가시 수 율이 증대되었다. 최적수분농도는 55%로 결정되었다 .

버섯은 탄수화물, 단백질 ,지질 무기질 등 다양한 영양소 를 함유하고 있으며 함암활성, 면역증가 효과 및 황산화 효과 등의 약리효과가 있다. 약용버섯인 상황버섯 (Phellinus linteus) 균사체의 액체 배양 발효공정 개선을 위한 균사체 배양조건의 최적화와 β-glucan 생성을 극대 화 할 수 잇는 배지 개발 및 배양시간에 따른 β-glucan의 함량 변화에 관한 연구를 수행한 결과, 배양 온도는 28℃, 초기 pH는 5,5, 통기량은 0.50 vvm에서 균사체의 생육 및 β-glucan 생성이 양호하였다. 균사체 배양을 위한 최 적배지 (RGP배지)는 증류수 1L 중에 glucose 50 g, 미강 추출물 30 ml, peptone 10 g, malt extract 5g, K2HPO4 1 g 및 MgSO4·7H20 1 g을 함유하는 것으로 나타났으며 이 배지에서 7일 배양 후 얻은 균사체량 및 β-glucan 함량은 각각 35.9 g/l 및 34.0%(w/w) 이였다. 3%의 미강추출물 첨가시 균사 생육 및 β-glucan의 함량 증가가 가장 높게 나타났다. 배양시간에 따른 β-glucan의 함량 및 glucose 량의 변화는 72시간까지는 β-glucan의 함 량 이 9.2%(w/w)였으나, 96시간부터는 19.3%(w/w)로 급격 히 증가하였고 잔존 glucose량은 배양시간 72 시간까지 는 3.5% 이상을 유지 하였으나 96시간부터는 3.0% 이하 로 떨어졌다.

농업과학기술원 응용미생물과에서 수집 보존 중 인 Paxillus curtisii 등 45속 71종의 총 71균주에 대해 육종 모본으로서의 가치를 탐색하였다. 우선 이들의 자실체의 발생 유무와 특성을 조사하기위하여 톱밥배지를 사용한 병재배를 통하여 자실체 형성을 유도 하였다. 이 중 Panus rudis(참버섯), Hericium coralloides (산호침버 섯), Coprinus verrucispermus, Collybia erythropus, Pycnoporus coccineus (간버섯), Oudemansiella mucida (끈적긴뿌리버섯) 등의 자실체 발생이 좋았으며 Gymnopilus spectabilis (갈황색 미치광이 버섯) 같은 독 버섯도 발생이 용이하였다. 또한, 이들이 분해력을 검정하 기위하여 Poly-R 시약을 이용한 간이 검정을 실시한 결 과, Criolus hirusutum가 분해력이 가장 우수하였다. Laccase 효소 활성도는 Mycena rorida, Xeromphalina cauticinalis가 가장 높았으며 Criolus hirusutum도 높은 활성도를 보였다. 이상의 결과로, 자실체발생이 용이한 Hericium coralloides, Oudemansiella mucida 등은 식용 버섯의 육종 모본으로, 난분해성 간이검정 효과결과에서 보면 Criolus hirusutum, Mycena rorida, Xeromphalina cauticinalis, Criolus hirusutum 등은 생물정화분야에 좋 은 자원이 적용되수있을 것으로 판단된다.

국내 버섯의 소비량은 국민소득 증가와 함께 생산량과 소비량이 꾸준히 증가하고 있으며, 총 생샌액은 약1조원 으로 농림업의 2.1%를 차지한다. 우리나라 버섯류는 느 타리, 팽이, 표고, 큰느타리(새송이), 양송이가 거의95% 이상을 차지하며 이중 느타리버섯이 총생산량의 35.1% 를 점유하여 재배면적과 생산량이 가장 많은 실정이다. 느 타리 (Pleurotus ostreatus)의 경우 2004년 595 ha에서 2005년에 555 ha로 약간 감소하였고, 단위면적당 수확량 은 '91년 41kg에서 '04년에는 29kg/3.3㎡으로 감소하였 다. 이는 병해충의 발생에 의한 생산성의 불안정과 국내가 격의 하락에 의한 농가수입 감소로 재배기피 현상이 발생 하였기 때문이다. 따라서 본 시험은 느타리버섯 균상재배 시 균상내 미생물상의 다양성을 구명하고 이들 미생물과 버섯균과의 상호작용 및 병원성과의 연관간계를 구명하 고자 수행하였다. 균상내 배지의 미생물상은 생육기간이 길어질수록 호기성세균 및 사상균의수가 증가하였고, 내 열성세균 및 형광성 Pseudomonas속은 종균 접종 초기에 높은 밀도를 보였다. 고온성 방선균은 전 생육기간 고른 분포를 보였지만 중온성 방선균은 재배과정 중 존재하지 않았다. 특히 발효 및 생육이 불량한 배지의 경우 접종 60 일에 사상균의 밀도가 급격히 증가하여 더 이상 버섯재배 가 불가능하였다. 생육시기별 분리세균의 버섯균주에 대 한 영향을 조사한 결과 살균 및 후 발효 초기에는 저해정 도가 적었으나, 생육이 진행될수록 저해균의 수가 증가하 였다. 또한 이들 분리세균은 균체 자체보다는 균이 내는 분비성물질에 의해 버섯균주의 생육에 영향을 미침을 알 수 있었다. 균상배지에서 분리한 세균의 동정결과 Bacillus sp.와 Flavobacterium sp.이 우점하였으며, 세균 성갈병균인 P. tolaasii균도 분리되었다. 이는 세균성갈반 병균이 배지내에 존재여 생육함으로 재배환경이 열악해 지거나 버섯의 생육이 불량할 경우 심한 피해를 줄 것으로 생각된다. 이들 분리세균은 세균성갈반병균에 대해 약 13%만이 아주 약한 길항성은 보였으며, 분리 세균과 버 섯의 발이와 생육 그리고 병원성에 대한 상관관계는 추후 면밀한 연구를 통해 밝혀야 할 것으로 생각된다.

버섯은 국내에서 재배되고 있는 주요 작목 중의 하나로 전체 재배면적은 2002년 1,212 ha에서 2005년 1,359 ha 로 조금씩 증가하는 경향을 보였지만, 느타리 (Pleurotus ostreatus)의 경우 2004년 595 ha에서 2005년에555 ha로 약간 감소 하였고, 양송이(Agaricus bisporus) 또한 2004년 196 ha에서 2005년에 176 ha로 약간 감소하였다. 최근 느타리와 양송이버섯에서 갈변증상을 보이는 병반에서 여러 병원균이 분리 동정되어 보고 되고 있으며, 이들 중 세균성 병해는 갈반병(brown blotch), 미이라병(mummy disease), 세균성부패병 (bacterial rot), 세균성구멍병 (bacterial pit), 위축병 (weeping disease) 등이 알려져 있 다. 비록 Pseudomonas tolaasii에 의한 세균성갈반병이 가장 많이 알려져 있지만, 세균성 갈반병에 관여하고 있는 병원균에 대해서는 현재까지 많은 논쟁이 되어오고 있다. 이 연구는 버섯재배 과정 중 발생하고 있는 갈변증상으 로 부터 분리한 세균의 분포, 특징 및 그 병원성을 조사하 고자 수행 하였다. 버섯 재배 중 갈변증상을 보이는 병반 으로 부터 60균주의 세균을 분리한 결과, 13균주가 흰색 침강선(white line)을 형성하였고, 우점균은 P. tolaasii (13균주)와 Ewingella americana (12균주)였다. 또한 병 원성 검정에서는 느타리버섯에 32 균주, 양송이버섯에 29 균주가 병원성을 나타내었다. 느타리버섯 재배 중 Pseudomonas tolaasii에 의한 세균성갈반병은 갓과 대에 전형적인 진한갈색의 움푹 패인 병징을 나타내었고 수확 기 버섯의 상품가치를 떨어뜨려 농가에 심각한 피해를 주 고 있다. 그리고 장내세균과 (Enterobacteriaceae)에 속 하는 E. americana는 양송이의 대속 갈변과 관련있는 병 원균으로 양송이 대속괴사병 (internal stipe necrosis)의 원인균으로 밝혀졌다. 이 병의 증상은 수확을 한 후에 확 인이 가능하고 대의 중앙에 갈변증상을 일으켜 상품가치 의 저하를 초래한다. 이들 분리균주를 여러 버섯에접종시 험을 한 결과 전형적인 갈변증상을 보였고, 특히 양송이의 대속에 접종하였을 경우 괴사 증상이 뚜렷하였지만, 일반 적인 세균성 무름병과는 다른 양상을 보였다. 또 하나의 특징적 무름병 세균인 Burkholderia gladioli pv. agaricicola가 느타리버섯의 갈변증상으로 부터 분리되었 으며, 이 균주는 양송이, 느타리버섯, 큰느타리에 강한 병 원성을 나타내었다. 그러나 느타리버섯에서의 초기 병징 은 P. tolaasii에 의한 세균성 갈반병과 구별하기 힘들며, P. tolaasii 보다 강한 갈반의무름증상을 보였다. 이들 분 리균 중 E. americana와 B. gladioli pv. agaricicola는 버섯 병원균으로 분리동정은 국내에서 첫 보고로 생각된다.

우리나라에서 느타리버섯류는 가장 많이 재배되는 버섯 이다. 크게 느타리, 큰느타리(새송이)로 구분된다. 2005년 현재 버섯 총 생산량은 21만여 톤이며 느타리는 28.2%, 큰느타리는 21.4% 생산되어 거의 50%를 차지한다. 느타리는 버섯 생육 시 산소공급을 위하여 환기가 필수적 이므 로 재배사내에서 외부기온의 영향을 크게 받는다. 따라서 계절에 따라 알맞은 품종을 선택하여야 에너지 절감과 생 산량을 높일 수 있다. 최근까지 보급된 느타리버섯류 77 개 품종을 계절별로 상자재배 하여 온도 적응성에 대한 그 특성을 분석하였다. 봄∼여름 재배 시 높은 온도(16 이상)에 적응성이 강한 품종(내서성이 강함) 으로는 사철느타리종, 여름느타리 종, 분홍느타리종의 8개 품종들이 속하였다. 봄∼여름 재 배 시 높은 온도에 적응성이 다소 강한 품종(내서성이 다 소 강함)으로는 느타리종 51개 품종으로 나타났다. 춘추2 호는 수량성이 아주 높지만 균상재배에서 16 이상 처리 되면 자실체 발생이 급격이 줄어들면서 곧 전혀 발생되지 않는 특성이 있다. 가을∼겨울 재배 시 낮은 온도(11 이 하)에 적응성이 다소 강한 품종으로는 느타리종 64품종 으로 나타났다. 원형느타리는 봄재배보다는 겨울재배에 적응성이 높았다. 원형느타리는 낮은 온도에서 자실체가 발생은 되지만 저온이 지속되면 대가 항아리처럼 굵어지 면서 짧아진다. 원형느타리는 폐면보다는 볏짚배지 재배 에서 다발성이 더 크게 형성된다. 사계절 재배 시 적응성 이 다소 강한 품종으로는 49개 품종으로 나타났다. 이 중 에서도 적응성이 높은 품종으로는 김제8호, 김제9호, 김 제10호, 부평복회, 부평흑단4호, 삼구5호, 삼구8호, 삼구 9호, 삼구황학, 수한, 신농12호, 왕흑평, 장안2호, 장안3 호, 장안5호, 장안7호, 치악5호, 치악7호, 한라1호 등이다. 큰느타리, 아위느타리, 전복느타리종은 균사생장이 느려 오염이 심하여 상자재배에서는 적합하지 않았다. 이러한 품종 특성 구명은 품종의 계절별 올바른 선택으 로 에너지 절감과 생산성 향상에 의한 농가소득에 기여할 것이며, 나아가 농가와 종균배양소간의 분쟁해소, 품종육 성자의 개발 품종에 대한 상대적 위치, 육종모본 선택, 농 가지도 사업에 유용하게 활용될 수 있을 것이다.

Mushroom is the only microorganism cultivated as the crop, and Plerotus ostreatus is one of the most important edible mushrooms. Efficient production of edible mushrooms relies on the precise control of fruiting body development, and an identification of the molecular mechanism of fruiting body development has commercial and scientific importance. In order to identify the developmentally regulated genes during fruiting body development, cDNA libraries were constructed from eight developmental stages of the P. ostreatus. From these libraries, 11,761 expressed sequence tags (ESTs) were generated. Based on these results, we performed macroarray analysis using 1,528 unigene clones at three developmental stages of mycelium, fruiting body and basidiospores. Plasmids isolated from these clones were blotted on the nylon membrane. The isotope-labelled cDNA probes for hybridization of the northern blot were prepared from total RNAs isolated from three developmental stages of mushroom. The 33, 14, 10 unigenes were very highly expressed in mycelia, fruit body and basidiospores, respectively. To confirm expression pattern of these genes, RT-PCR was performed using the total RNA isolated from three developmental stages. Seven genes were successfully amplified in RT-PCR. The expression patterns of the genes were similar with that in macroarray. One of seven genes was identified as a 12kDa heat shock protein and its expression level was very highly at fruiting stage, but not detected at mycelium stage.

Cystoderma list of the species found in Korea is composed of 6 species(Lee & Lee 2000). Cystoderma in Korea is Cystoderma amiaanthinum, Cystoderma carcharias, Cystoderma fallax, Cystoderma granulosum, Cystoderma japonicum and Cystoderma terreii. As the member of Lepiotaceae, Cystoderma belongs under Eumycotina, Basidiomycotina, Eubasidimycotina, Hymenomycetidiae, and Agaricales. Its outer pileus of Cystoderma is serrate radially, a small scale is scattered its peridium. And stipe has a small annulus attached to it. spores is subspore or fusiform, white and it has pseudoamyloid. Each shape, size, shine and quility of fruiting body of Cystoderma is different in the breed and it is important sources of a classification of Cystoderma. Especially, the shapes and colors of various scaly which are on the surface of the fungus are important to the external classification.

산느타리버섯(Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quelet)은 담자균문, 주름버섯목, 송이과, 느타리 버섯속에 속하며 성숙한 갓의 모양은 폐모양이며 자실체는 여름에서 초가 을 사이에 침엽수의 죽은 부위에서 발생하며 항염증, 항콜 레스테롤, 항고지혈증의 생리활성을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 본 실험은 새로운 유망 야생버섯을 개발하 기위하여 강원도 내·외에서 수집한 산느타리버섯 10계 통에 대하여 균사배양 특성 및 병재배시 자실체 특성을 검 정하여 수량 및 품질이 우수한 GWM-20107 등 4계통을 1차로 선발한 후 선발된 4계통의 단포자 분리 및 4계통간 교배를 하여 교배계통 600계통을 육성하고, 육성된 교배 계통에 대한 2차 선발을 하여 강원도 자생종 수집계통인 GWM20107와 GWM20148 과의 교배계통으로서 Ppm- 430 계통을 우량계통으로 선발하였다. 선발된 Ppm- 430계통의 주요 특성으로는 자실체 발생온도는 16∼ 18℃, 생육온도는 15∼17℃이며 850㎖ 병재배가 적합하 며 병재배시 군사배양기간은 32일이며 균긁기 후 초발이 소요일수는 3.4일이었다. 자실체의 발생형은 다발형, 갓 의 단면 형태는 얕은깔떼기형, 갓의 색깔은 흑갈색, 대의 색깔은 흰색, 갓에 대한 대의 부착형은 편심형, 수량은 850㎖병당 102.2g이었으며 맛과 색깔이 양호하였으며 적합한 배지조성은 미송톱밥25+면실박20+콘코브25+ 비트펄프30%이었다.

우리나라에서 느타리버섯류는 가장 많이 재배되는 버섯 이다. 생산량으로는 크게 느타리, 큰느타리(새송이)로 구 분된다. 2005년 현재 버섯 총 생산량은 21만 톤이며 느타 리는 28.2%, 큰느타리는 21.4% 생산되어 거의 50%를 차지한다. 느타리버섯류는 다양한 종으로 여러 가지 자실 체 색깔을 가진다. 느타리종 자실체 갓은 일반적으로 회색 을 나타낸다. 최근 노랑느타리, 분홍느타리를 비롯하여 갓 색깔이 갈색, 백색, 흑색, 청색느타리가 개발되거나 개발 중이다. 느타리 회색계통 ASI 2194와 ASI 2487을 계통 간 균사접합으로 계통간 교잡체를 56개를 얻었다. 이들 대부분은 모균주와 동일하거니 유사한 자실체 색깔을 나 타내었다. 하지만 이 중에서 품종 '청'은 아주 균일한 청색 을 나타내었다. 어린 자실체는 진한 청색이며 성숙할수록 색깔이 옅어진다. 이 품종의 균사생장은 25∼30℃에서 양호하였고, 자실체 생장은 12∼16℃에서 양호하였다. 이 품종은 현재 품종보호출원 중이며, 일부 농가에서 확대 재배 시험 중이다. 이러한 다양한 빛깔의 느타리버섯류는 아직 소비자들에게 익숙하지 않아 대량 소비처가 없다. 따 라서 학습농장, 버섯테마 농장, 주말농장, 음식점을 겸한 농장에 재배 활용하기를 권하고 싶다.

This study was carried out to investigate amino acid contents of golden mushroom and pink mushroom. The amino acid analysis was followed by AccQ-Tag method and HPLC on gradient conditions. Seventeen amino acids were analyzed and sixteen amino acids were found in golden mushroom ; fifteen amino acids in pink mushroom respectively. Among total amino acid in golden mushroom, cystein content was the highest and glycine, glutamic acid, proline were followed. Among total amino acid in pink mushroom, cystein was the highest and glycine, lysine, methionine were followed. As shown in Fig.1, 2, concerning amino acids, cystein was dominant. and alanine was detectied in golden mushroom but pink mushroom.

표고 버섯 자실체와 균사체의 EST 분석으로 Unigene 1,582개를 선별 하였으며 Expected-value를 고려한 유 효유전자를 10개 선별하였다. BAD11817.1, BAD11816.1, BAD11818.1, BAA28693.1 은 100% 의 상동성을 나타 내었으며, BAD97446.1, BAA83550.1, AAD37722.1에 서 90% 이상의 상동성을 나타내는 것으로 분석되었다. 표 고버섯 자실체 발생 관련 유전자를 분석하기 위해 기 발표 된 자실체 관련 발생 유전자 39개를 확인하였으며 GeneFishingTM DEG(Differentially Expressed Gene) screening 방법으로 300 bp ∼ 1,200 bp 범위에서 발현 반복 실험을 통해 재현성이 있고 밴드가 sharp한 90 개를 DEG 분석으로 선별하였다. 그 중에서 26개의 DEG 밴드 를 골라 염기서열을 결정하여 자실체에서 발현이 뚜렷하 게 보이는 유전자 6개를 확보하였다.

곰보버섯(Morchella esculenta)의 일반명은 'morel'로 불리며, 분류학상 진균문 자낭균아강, 곰보버섯과, 곰보버 섯속에 속하는 야생의 식용버섯으로 전 세계적으로 분포 한다. 국내에서 곰보버섯 자실체 발생은 4월 초·중순경 에 자연상태의 토양이나 밭이랑 또는 산간지역에서 산불 이 난 다음해에 많이 발생한다. 자실체는 자낭과를 형성하 고, 자낭과 표피에 8개의 자낭포자를 형성한다. 이 버섯은 발생 기간이 짧고 단생형이며, 산발적으로 발생하므로 자 실체를 채집하기가 어려운 편이다. 본 시험에서는 농업과학기술원에 수집 보존된 곰보버섯 11균주에 대하여 분자생물학적 유연관계 분석을 통한 종 (species) 구분을 실시하고, 균주간의 배양생리적 특성을 구명하고자 하였다. 분자생물학적 유연관계 분석을 위하여 rDNA PCRRAPD와 sequencing을 실시한 결과, MKACC 50271, 50272, 50768이 그룹Ⅰ(M. crassipes; 굵은대곰보버 섯), MKACC 50364, 50621, 50914가 그룹Ⅱ(M. esculenta; 곰보버섯), MKACC 53347이 그룹Ⅲ(M. conica), MKACC 50855, 51008, 51009, 53729가 그룹 Ⅳ(M. elata) 등 4그룹으로 구분되었다. 균주별 균사생장 최적배지, 배양온도, 배지 pH는 동일 그룹이라도 일정한 경향을 보이지 않았다. MKACC 50855, 51008, 53729 는 배양속도가 1일 30 ㎜이상으로 빨랐고, MKACC 50271, 51347, 53729는 균핵 형성량이 많았다. 또한 공 시 균주들은 톱밥봉지 배양균사체의 양송이 복토를 이용 한 매몰재배 시험에서 자실체가 발생하지 않았다.

Agaricus blazei is well known as a traditional medicinal mushroom and it has been shown to exhibit immunostimulatory and anti-cancer activity. However, the cellular and molecular mechanism of apoptosis of cancer cells is poorly understood. In this study, we have investigated whether A. blazei extract (ABE) exerts anti-proliferative and apoptotic effects on human leukemia THP-1 cells. It was found that ABE induced a time- and dose-dependent increase in leukemia cells apoptosis through caspase-3 activation and PARP cleavage. Activation of caspase- 9 induced by ABE suggested that ABE-induced signaling was mediated through a mitochondrial death pathway. In addition, we observed an elevation of ROS and a consequent loss of mitochondrial membrane potential, further suggesting that ABE-induced death signaling was mediated through a mitochondrial oxygen stress pathway. The antioxidant Nacetylcysteine, however, opposed ABE-mediated mitochondrial dysfunction, caspase activation, and apoptosis, supporting the role of ROS in the apoptotic process. We conclude that ABE induces apoptosisin human leukemia cells through a reactive oxygen species and caspase-dependent mitochondrial pathway.

This study was carried out to investigate the growth inhibition of Propionibacterium acnes by mycelial culture broth of Paecilomyces japonica in the Mulberry leaf extract. The results are as following. The growth inhibition effect of P. japonica mycelial culture broth against P. acnes in various concentration of Mulberry leaf extract was the most effective in 3% Mulberry leaf extract. The inhibition effect of P. japonica mycelial culture broth against P. acnes in Mulberry leaf extract according to the culture time was the moust effective for 25 days cultivation. As the treating volume of the mycelial culture broth was increased, the growth inhibition effect against P. acnes was increased as well. The growth inhibition effect of mycelial culture broth against P. acnes according to the time of heat treatment was active by 45min at 100℃, while it was inactive at more than 60min. Taken together P. japonica mycelial culture in the Mulbarry leaf extract has a possibility to be an element of skincare cosmetics regulating the acnes. This means that the enzyme may be used for health-care such as thrombosis without any hamful behavour in the blood vessel.

Cordyceps militarisis well known as a traditional herbal ingredient, which has been used for patients suffering from cancer in oriental medicine. In this study we have investigated the biochemical mechanisms of anti-proliferative effects by C. militarisextract(CME) in human breast cancer MDA-MB-231 cells. It was found that CME treatment induced chromatin condensation, mitochondrial energization, annexin V staining and sub-G1 phase DNAcontent. These indicators of apoptosis correlate with the mitochondrial dependent pathway, which results in the activation of caspase-3 activity. Both the cytotoxic effect by CME treatment were significantly inhibited by z-DEVD-fmk, a caspase-3 inhibitor,demonstrating the important role of caspase-3 in the observed cytotoxic effect. Cotreatment of CME and LY294002, resulted in significantly induction of apoptosis. These results indicate that caspase-3 is a key regulator of apoptosis in response to CME in human breast cancer MDAMB- 231 through downregulation of Akt, and that the C. militaris extract may therefore have therapeutic potential against human breast cancer.

The caterpillar-shaped Chinese medicinal mushroom (DongChongXiaCao) looks like a worm in the winter and likes a grass in the summer. The fruiting bodies of Cordyceps species have demonstrated various biological activities and used as traditional medicines in Asian countries. The price of wild Cordyceps have been ascending every year as their demand increase. Recently, the artificial cultivation of these fungi has been successfully established and they are currently produced on a rice or pupae media. This study was carried out to investigate the soluble sugar, amino acid and fatty acid profiles in the fruiting-bodies of Cordyceps militaris, C. pruinosa and Paecilomyces. tenuipes formed on the living silkworm (Bombyx mori) host. Soluble sugars such as glycerol, glucose, mannitol and sucrose were found in the fruiting bodies of Cordyceps militaris, C. pruinosa and P. tenuipes. Total soluble sugar content was 29.23 ㎎g-1in C. militaris, 8.61㎎g-1 in C. pruinosa and 24.00 ㎎g-1in P. tenuipes on dry weight basis. Total free amino acid content was 14.09 ㎎g-1in C. militaris, 34.60㎎g-1 in C. pruinosa and 17.09 ㎎g-1 in P. tenuipes. The content of oleic acid in fatty acids was above high more than 30% regardless of species.

번데기동충하초(Cordyceps militaris)는 주로 나비목 (Lepidoptera)의 유충 또는 번데기를 기주로 하여 주황색의 곤봉형 자좌를 형성하는 곤충기생균(Entomopathogenic fungi)의 일종이며 자낭각은 반돌출형이며 원통형의 자낭 안에 실모양의 자낭포자들이 존재한다. 동충하초속균의 유용성분은 자실체에서 약리효과가 알려졌는데 약용동충 하초로는 C. sinensis, C. hawkesii, C. martialis, C. militaris, C. ophioglogossoides, C. sobolifera 등을 들 수 있다. 이 가운데 번데기동충하초가 생산하는 cordycepin (3,-deoxyadenosin)은 항세균, 항암효과를 가지고 있다. 본 연구는 번데기동충하초를 곡물을 기주로사용한 자실 체의 일반성분, 아질산소거능력, Tyrosinase 저해활성 능 력, DPPH에 의한 항산화 활성을 EtOH(70%)로 추출하 여 분석하였고, 또한 곡물배지 자실체를 상대로 Protease 활성검정, cordycepin 및 비타민류 함량 및 혈전용해능력 등을 조사한 결과를 보고하고자 한다. 가. 곡물배지의 번데기동충하초 일반성분인 조지방(%)은 현미 및 흑미배지자실체에서 2.90, 2.08, 조단백질(%) 은 28.5, 11.2, 회분(%)은 5.6, 1.7 이었다. 나. 알코올 70% 추출물에서의 아질산소거능력은 pH 1.2 는 현미 및 흑미배지자실체에서 91.0, 92.1 pH 3.0는 78.1, 83.2, 번데기에서 자란 자실체는 pH 1.2는 89.6, pH 3.0는 85.1로 조사되어, 곡물배지자실체가 양호하였다. 다. Tyrosinase의 저해활성 눙력(%)은 현미 및 흑미배지 자실체에서 76.3, 69.6, 번데기배지자실체는 67.2로 조사되어 현미배지 추출물이 멜라닌색소를 억제하는 Tyrosinase의 저해활성이 높은 것으로 조사되었다. 라. DPPH(DiPhenyl-2-PicrylHydrazyl)에 대한 항산화 활성(㎍/㎕)은 현미 및 흑미배지자실체에서 37.4, 32.6, 번데기배지자실체는 35.3으로 조사되어 차이가 없는 것으로 조사되었다. 마. 검정깨곡물배지 번데기동충하초 자실체의 혈전용해 능력은 번데기배지의 자실체를 보다 23%로 가장 높 은 활성을 보였으며, protease 활성 검정은 검정깨배 지의 자실체에서 protease활성이 67%로 가장 높고 흑미배지의 자실체는 번데기배지자실체와 동일하였다. 바. 혈전에 관여하는 fibrin의 용해시간은 검정깨배지의 자실체에서 30분부터 혈전이 용해되기 시작하였고, 번데기배지자실체는 1시간 이후부터 용해됨을 확인 할 수 있었다. 사. 현미곡물배지 번데기동충하초 cordycepin함량은 메 탄올(30%)분획에서 0.158㎍/12.5㎍(1.3%)로 곡물 에서 자란 자실체에서도 cordycepin을 확인하였다.

표고, 느타리, 양송이, 팽이등 버섯의 종류에 관계없이 발생되고 있는 푸른곰팡이병은 그린몰드(green mold)가 그원인으로 알려져 있으며 이들의 피해는 심각하다. 푸른 곰팡이병을 일으키는 곰팡이로는 Trichoderma, Gliocladium, Aspergillus, Penicillum 등이 현재 알려져 있다. 푸른곰팡 이 병원균은 균사생장 시 균상에 발생하여 버섯균의 균사 생장을 방해하거나 기생하여 버섯균사를 사멸시키며, 버 섯수확기에 병해를 발생시키고 있다. 따라서 본 연구는 버 섯의 수확을 저하시키는 Trichoderma를 억제하기 위하 여 수목추출물 2종을 혼합한 다음 그 효능을 평가하였다. Trichoderma에 대하여 항균력을 나타내는 유효 화합 물질을 확인하기 위하여 GC/MS를 이용하여 편백 휘발성 추출물을 분석한 결과, 50개의 테르펜계 화합물이 존재한 다는 것을 확인하였고 대부분의 물질이 동정되었다. 편백 휘발성 추출물의 주요 화학적 조성은 모노테르펜류인 sabinene 11.62%, limonene 4.31%, isobornyl acetate 6.23%, α-terpinyl acetate 11.75%였으며, 세스퀴테르 펜류로 elemol 11.08%, β-eudesmol 4.02%, epibicyclosesquiphellandrene 4.18%가 나타났다. 소나무와 편백 추출물의 혼합비율 10 : 1(g/g) 제제는 T. aggressivum에서 20.4%, T. atroviride에서 14.0%, T. harzianum에서 32.0%, T. koningii에서 26.8%, T. viride에서 19.0%의 항균활성을 나타냈다. Trichoderma 균주는 편백 추출물의 첨가량이 증가함에 따라 항균활성 이 감소하는 경향을 나타냈다. Trichoderma 균주는 편백 추출물보다는 소나무 열수추출물에 대하여 영향을 받았다.

laccase 유전자를 겨울우산버섯 내에서 발현을 증가시 켜 리그닌 분해효소의 활성을 강화시키고 리그닌 분해능 이 강력한 균주를 얻고자 형질전환을 시도하였다. 겨울우 산버섯 형질전환용으로 개발한 pHYgpt 벡터에 laccase 유전자를 삽입하여 과발현용 pHYlac1 벡터를 제작하여 REMI 방법으로 형질전환을 실시하였다. 항생제가 포함된 선발배지로부터 각각 13와 28개의 균사체를 선별하였고 여기서 genomic DNA를 분리하고 벡터 primer로 PCR 수행하여 pHYgpt는 9개, pHYlac1는 23개의 형질전환체 가 확인되었다. 염료 (Poly R, RBBR)가 첨가된 고체배지 에 형질전환 균사체를 배양했을 때 pHYlac1 형질전환체 는 야생형 균주에 비해 비교적 높은 탈색능을 보였다. 액 체배지 배양에서 laccase활성을 조사하기 위해 배지의 상 등액과 o-tolidine을 반응시켜 산화에 의해 나타나는 발 색의 정도를 분광기로 측정하였다. 벡터의 형질전환체는 전체 배양기간에서 야생형 균주와 활성이 비슷하게 나왔 으며 laccase가 과발현되는 pHYlac1의 형질전환체는 전 배양기간에서 높은 활성을 보였다. 배양기간과 균주에 따 라 차이는 보였지만 20일 전후에서 야생형 균주에 비해 10배에서 50배 이상 높은 활성을 보였다. 본 연구에서 형 질전환용벡터와 형질전환법을 통해 분자생물학적 기술을 이용한 분해능이 우수한 균주를 개발할 수 있는 형질전환 시스템이 안정적적으로 확립되었으며 앞으로 형질전환 체를 이용한 리그닌 분해와 이와 유사한 구조를 갖는 환경 호르몬의 분해를 위한 기술 개발에 적용할 예정이다.

푸른 곰팡이병을 일으키는 병원균은 매우 다양하며, 현 재까지 밝혀진 병원균은 Trichoderma spp., Gliocladium spp., Penicillium spp. 그리고 Aspergillus spp.로 이 중에서 Trichoderma spp.는 자낭균류에 속하는 Hypocrea spp.의 무성세대로서 발생빈도가 가장 높은 것으로 알려져 있다. 버섯의 병해 중에서 가장 방제가 어렵고 버섯의 발생 및 수확에 가장 큰 영향을 미치는 대표적인 병의 하나인 푸른 곰팡이병은 고온다습한 조건에서 많이 발생하며 발생초 기에는 버섯균과 비슷한 백색을 띄다가 포자가 형성되면 서 황록색 내지 진녹색으로 변하고, 골목의 표면에 부정형 의 병반을 형성하면서 버섯균의 생장을 억제하여 결국에 는 버섯균을 죽게 한다. 현재 버섯 재배농가에서는 버섯균 사생장 기간동안에 푸른 곰팡이병의 발생을 억제하기 위 하여 버섯배지 살균 전에 균상표면에 벤레이트, 판마쉬, 스포르곤수화제를 살포하는 것이 최대의 방제법이다. 따 라서 본 연구는 버섯 병해의 주범인 그린몰드(green mold)의 생장을 제어하기 위하여 수목추출물 및 nhexane 용해부의 효능을 비교 평가하였다. 수목추출물의 그린몰드에 대한 항균활성은 T. aggressivum 34.7%, T. atroviride 35.7%, T. harzianum 34.9%, T. koningii 31.0%, T. viride 30.7%로, 평균 33.4%의 항균 활성을 나타내었고, T. atroviride에서 수목추출물이 가장 높은 항균활성을 나타내었다. n-Hexane 용해부의 그린몰드에 대한 항균활성은 T. aggressivum 52.3%, T. atroviride 65.6%, T. harzianum 47.1%, T. koningii 48.5%, T. viride 51.1%로, 평균 52.9%의 항균활성을 나타내었고, T. atroviride에서 nhexane 용해부가 가장 높은 항균활성을 나타내었다. 수목추출물과 n-hexane 용해부의 그린몰드에 대한 항 균활성은 추출물의 농도에 따라서 5% 수준에서 유의성이 나타났다. 수목추출물과 n-hexane 용해부의 항균활성을 비교하 였을 때 수목추출물보다 수목 n-hexane 용해부에서 더 높은 항균활성이 나타났다.