Earticle

여러 가지 조성의 PEG 20000jDx로 구성한 수성 이상계를 사용한 에탄올 추출발효실험을 통하여 K. fragilis에 의한 돼지감자 주스의 발효 특성을 초기 당농도 및 생성 알코올 농도의 함수로 규명하여 다음의 결과를 얻었다. 균체의 비증식속도 빛 에탄올 비생성속도는 PEG 및 Dx 농도가 낮을수록 증가하였다. 비증식속도는 조성에 무관하게 초기 당농도 80g/l 를 보였고, 에탄올 비생성속도는 120g/l다. 생성 알코올 농도에 의한 저해 영향은 비증식속도에 대하여 지수함수형 을, 에탄올 비생성속도에 곡선함수형을 나타냈다. Dx 농도가 2.5~5% 범위에셔 PEG 농도 가 낮을수록 에탄올 저해 영향은 감소하였다. 총괄 에탄올 생산성은 초기 당농도가 증가할수록 높았으 며 생산성이 최대치에 도랄하는 소요시간도 당농도가 증가함에 따라 증가하였다. 시간별 에탄올 생산 속도는 초기 당농도 160g/l에서 가장 높은 값을 보 였다. 총괄 에탄올 생산성은 대조실험에 비하여 수 성이상계 추출발효를 통하여 1.2배 이상 증가하였고 초기 당농도가 높을수록 이상계 추출발효가 더욱 유리한 것으로 나타났다.

Fermentation characteristics of Kluyveromyces fragilis CBS 1555 with Jerusalem artichoke juice, in extractive ethanol fermentation in aqueous two phase systems composed of polyethylene glycol 20000 (PEG) and crude dextran(Dx), were investigated as a function of initial sugar concentrations, concentrations of ethanol formed, or fermentation time. Both specific ethanol production rate increased with decrease in concentrations of PEG and Dx in two-phase systems. Without being related to the compositions of aqueous two-phase system, maximum specific cell growth rate and maximum specific ethanol production rate were showed in the initial sugar concentration fo 80g/l and 120g/l, respectively. The inhibition effects of ethanol on specific cell growth rate and specific ethanol production rate decreased with decrease in PEG concentration and in the range of 2.5 to 5% Dx. Specific cell growth rate and specific ethanol production rate was fitted as an exponential function and a hyperbolic function, respectively, of the concentrations of ethanol formed. Overall ethanol productivity increased with increase in initial sugar concentrations, and also the required time for the maximum productivity was so. Ethanol production rate by the elapsed fermentation time showed the maximum value in the initial sugar concentration of 160g/l.

Taxus cuspidata 현탁배양에서 세포생장과 항암제 taxal의 생산에 있어서 당의 영향을 살펴 보기 위하여 여러 농도에서 세포배양을 하였다. 40g/l 의 자 당이 첨가하였을 때 비생장속도는 0.076day-1로 최 대였으며, 의 자당이 첨가되었을 때에는 25 일 배양 후 최고 세포 농도인 34 g DCW/l를 나타내었다. 이때 당 소모 대비 세포수율(Yx/y)은 0.55 g celljg sucrase였고, 배가시간(Td)은 9.12 day였다. Taxal의 생산은 80g/l 이상의 높은 당농도 첨가시 와 당 및 asmaticum의 동시 처리사에 현저히 증대되었다. Taxal의 최대생산은 80 gj C 자당 첨가시로 1.36mg/l였으며 이것을 단위 세포건조중량당으로 계산하면 0.01 %이었다.

The effects of sucrose on cell growth and anticancer drug taxol production were investigated in cell suspension cultures of Taxus cuspidata. The cells were cultured at various concentrations of sucrose (20 to 100g/l). The highest specific growth rata was achieved at 40g/l of sucrose as 0.076 day-1 and the highest final cell density, 34 g DCW/l after 25 days of culture, was obtained at 60g/l of sucrose. The cell yield(Yx/s) was found to be 0.55g cell/g sucrose and doubling time (Td) was 9.12 day. High concentration of sucrose (80, 100g/l) and the addition of osmoticum enhanced the production of taxol significantly. The maximum taxol production was 1.36mg/l at 80g/l of sucrose, which was 0.01% as a specific content.

곰팡이 세포농도를 측정하기 위하여 pellet에 대한 침강 특성을 고려하여 홉광도를 측정하는 새로운 방법을 개발하였다 Pellet의 침강을 막기 위해 spec trophotometer의 cuvette 내에셔 소형 마그네닥바 로 시료를 적절히 교반시켰는데 그 결과 안정된 값의 흡광도를 얻을 수 있었으며 세포의 건조중량과 흡광도간에 선형적인 관계가 었는 것으로 나타났다. 그러나 크기별로 pellet입자를 분리한 결과 입자 크 기별로 통일한 흡광도에서 셔로 다른 건조중량을 갖는 것으로 나타났으며 입자의 직경이 355um 이상인 경우 교반에 의한 홉광도를 측정할 수 없었다. 이상의 결과로부터 pellet을 형성하는 곰팡이 배양액의 경우 pellet의 침강 특성을 고려해 줌으로써 흡광도 를 이용한 곰팡이 세포농도의 측정이 가능하다는 결론을 얻었다.

A new method that considers the pellet sedimentation characteristics for fungal cell concentration measurement was developed using optical density. Appropriate mixing of the pellet suspension almost homogeneously was tried to prevent the sedimentation of the pellet by a small magnetic bar in cuvette, giving a stable optical density. The linear relationship between optical density and the dry cell weight was obtained. However, different curved lines were observed according to the pellet size. Optical density couldn't be detectable in the size range of 355um above. It was concluded from the result that the use of optical density for measuring cell concentration in fungal broth became possible by considering the characteristics.

공업적 응용 가능성을 검토하기 위하여 한국의 근해 연얀저토에서 분리한 청색색소를 생성하는 Streptomyces sp.의 성질을 조사하였다. 탄 소원은 가용성 전분으로서 1% 였고, pH 7.0 이 상의 약 얄칼리성에셔 최대성장을 하였으며, 다량의 청색색소를 생생하였다.

A marine Streptomyces sp., which produce water-soluble blue pigment was isolated from shallow-sea muds. The effect of various nutritional conditions on growth of isolated strain were investigated to facilite the potential use of this organism in industry. The effect of carbon source was characterized as a 10g/1 of soluble starch. Growth was optimum at pH 7.0 and slightly affected with more alkaline range but was shown to decrease dramatically in acidic range. Under the optimum growth conditions, isolated strain produced substantial amounts of blue pigment and biomass.

본 연구의 목적은 시판 퍼l녹시계 제초제 2,4-D의 생물학적 처리의 가능성을 평가하기 위한 것이다. 시판 페녹시계 제초제는 2,4-0 아민염 으로셔 2,4-0( 40%)와 용제 (60 % )로 구성 되었다. 2,4-D에서 농화배양에 의해 얻어진 미생물 컨소시염은 탄소원 빛 에너지원으로서 2,4-0를 이용하였다. 이 설험에서 2,4-D분해의 최적 pH 와 기 질농도는 각각 7.0과 54mg/ E 였다. Yeast extract와 ascorbic acid의 첨가는 2,4-0의 분해 와 미생물의 생장을 촉진시켰다. 2,4-0를 정량하기 위해 HPLC가 사용되었으며 그 과정에셔 중간대사물질로셔 2,4-0CP가 분리되었다. GC MS는 2,4-0CP를 입증하기 위하여 사용되였다. 배양중의 UV scans 결과, 2,4-0의 최대흡광치는 배양이 진행되는 동안 감소되었으나, spectral 및 peak 변화는 보여주지 않았다.

The purpose of the work was to evaluate the feasibility of a biological treatment process for the phenoxy alkanoic herbicide 2,4-D(2,4-dichlorophenoxyacetic acid) as a commercial pesticide. The phenoxy herbicide was 2,4-D amine salts which contained 40%(vol/vol) 2,4-D and 60%(vol/vol) solvent. A microbial consortium has been derived by enrichment with 2,4-D. The consortium utilized 2,4-D as the sole source of carbon and energy. Optimal pH on the 2,4-D degradation was 7.0 in this experiment. As concentrations of 2,4-D were increased, the degradation by microbial consontium became inhibited. The amendment with yeast extract and ascorbic acid accelerated the degradation of 2,4-D. High performance liquid chromatography methodology was used to measure 2,4-D and it also resolved 2,4-DCP(2,4-dichlorophenol), the corresponding phenol as intermediate. Gas chromatography-mass spectrometry was used for preliminary identification of the intermediate 2,4-DCP. UV scans of spent cultures showed that the maximum absorption of 2,4-D at the wavelength of 283 nm was decreased toward the end of incubation, but the consortium displayed no detectable spectral changes or peak shifts in the UV absorbance.

A. eutrophus 균주를 이용하여 여러 변수에 대한 균성장속도 및 PHB 축적 변화를 고찰하였다. 글루 코오스 및 $>(NH_4)_2HP0_4$를 탄소원 및 질소원으로 사용할 경우가 균 성장 및 PHB 합성에 있어서 다른 기섣에 비해 효율적이었다. $>NH_4^{3-}, P0_4^{3-}, Mg^{2+}$등 을 제한하였을 경우 PHB의 축적이 촉진되었으며, 그 중 $>NH_4^+$가 가장 효율적인 제한 인자였다. Yeast extract를 기절 중에 첨가하였을 경우 성장속도가 1.5배 정도 증가하였는 바, 이는 단백질을 비롯한 비타민과 아미노산 등의 미량원소의 영향으로 사료된다. 균 성장시 산소가 부족할 경우 배출되는 부생성 물은 주로 butanedio\과 에탄올이었으며, 그 중 에 탄올이 균 성장에 저해 효과를 나타냄을 확인하였다

To find out the optimum conditions for the cell growth and the synthesis of PHB in A. eutrophus, the effects of culture conditions and extracellular by-products were investigated. Glucose and$>(NH_4)_2HP0_4$were optimum carbon and nitrogen sources, respectively for cell growth of A. eutrophus. PHB accumulation was stimulated by deficiency of nutrients such as $>NH_4^{3-}, P0_4^{3-}, and Mg^{2+}$ in the medium. $>NH_4^+$, deficiency was the most suitable for PHB accumulation and PHB accumulation ratio was reached 42% of dry cell weight. The specific growth rate was increased 1.5 times by addition yeast extract in the medium, and proteins and vitamins are supposed a main factor of that effect. The extracellular products such as ethanol and butanediol were excreted under anaerobic conditions. And ethanol was found to decrease the specific growth rate.

중공사막 반응기를 이용한 유용단백질의 분리 빛 효소로 분해된 단백칠 가수분해물의 분자량별 분획 에 있어서 발생되는 fouling 현상은 투과유출속도의 감소와 막반응기의 효율적인 이용에 문제가 되는 주 된 원인이다. 따라서 본 연구에서는 중공사막(MW 10,000 cut off)반응기를 이용하여 단백질(gelatin, milk casein 및 bovine serum albumin)을 연속적으 로 가수분해할 때 가수분해물의 한외여과에 있어 발생되는 fouling을 알아 보기 위해 막반응기의 작동 시간, 단백질 용액의 농도, 온도 빛 pH 변화에 따른 투과유출속도로 측정하였으며, 아울러 효소 첨가에 의한 생성물의 투과유출속도도 효소무첨가구와 비교 검토하였다. Gelatin용액의 초기 투과유출속도는 19.3l/m2.hr로 작동시간에 관계없이 거의 일정하였으며, casem 빛 albumin용액은 각각 작동시간 60 분 후에 초기 투과유출속도의 50% 빛 43%가 감소 하였다. 단백질 용액의 농도 빛 온도의 증가에 따른 투과유출속도는 증가하는 경향을 보였으며, pH 변 화에 따른 투과유출속도는 세 종류의 단백칠 모두­등전점 pH영역에서 가장 낮았다. Alcalase의 첨가 로 인한 gelatin 용액의 투과유출속도는 작동시간 40분까지 초기 투과유출속도에 비해7.51l/m2/hr 증가하였으나, 불용성 단백질인 cas em 빛 albumin 용액의 투과유출속도는 초기 투과유출속도에 비해 감소하는 경향이였다. 그러나 효소를 첨가하지 않았 을 경우보다는 향상되었다. 따라서 연속식 재순환 막효소반응기에셔 분해물의 투과유출속도는 단백질의 성질이 변하지 않는 온도범위 내에서 온도의 증가 및 등전점 pH영역을 벗어난 pH로 조정해야 하며, 불용성 단백질의 경우는 가수분해시 미리 단백질을 효소로 엘정시간 처리한 다음 재순환시키면 fouling을 현저하게 감소시킬 수 있다

It is known that a key limiting factor to the use of ultrafiltration membranes is that of membrane fouling, which has been a major cause of permeate flux reduction. In this work, the effects of several factors (operating time, protein concentration, temperature and pH, etc.) influencing permeate flux during ultrafiltration of gelatin, casein and bovine serum albumin using a hollow fiber membrane(M. W. 10,000 cut off) reactor have been examined. The permeate flux of gelatin solution was maintained almost constant during the operation up to 6 hours, but those of casein and albumin solutions were decreased to 50% and 43% of initial value after an operation time of 60min. The permeate flux with increasing concentration and temperature of protein solutions increased, but the permeate flux showed a minimum value near the isoelectric point of proteins. The permeate fluxes of protein solution were enhanced by a temperature increase and pH control. Also, it is proposed that fouling can be decreased by the pretreatment of insoluble proteins with enzymes.

설관막 장치를 이용하여 대장균의 투석배양을 수 행했다. 투석액으로 배지 내의 초산을 제거함으로써 초산의 저해효과를 경감할 수 있었다. 초산 생성속도는 포도당과 용존산소농도에 대단히 민감하였고, 따라서 막을 통한 포도당의 투과속도는 산소공급속도와 균형을 유지해야 했다. 막을 통해 포도당이 천 천히 공급될 때, 대장균의 비성장속도는 포도당 투 과속도에 좌우되었고 초산의 생성은 억제되였다

A hollow fiber device was utilized to perform a dialysis culture for E. coli. Acetic acid inhibition on the growth of E. coli was relieved by dialyzing the acid from broth into a dialysate reservoir. The rate of acetic acid formation was very sensitive to the concentration of glucose and dissolved oxygen. Therefore it was found that the glucose permeation rate should be balanced with the oxygen supply rate. Specific growth rate of E. coli was determined by the glucose permeation rate through membrane. Under a low permeation rate, acetic acid formation was depressed in accordance with high dissolved oxygen concentration as well as low glucose concentration.

Bacillus macerans cyclodextrin glucanotrans­f ferase(CGTase)를 전분흡착법과 DEAE--cellulose 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 효소의 분자량 은 67,000이였고 monomer였다. 정제된 효소는 전 분을a-, B-, r-CD 로 전환시켰으며, CD생성비율은 각각 1 : 1.68: 0.32였다. a-CD와 D-glucose의 coupling반응 초기에는 maltohexose가 주로 생성되었고, 그 후에 다른 oligosaccharide들이 생성되었다 .. a­C CD의 가수분해반응 초기에는 주로 maltotetrose가 생성되였고 그 이후에는 소량의 다른 이Igosa­C ccharide들이 생성되었다. 정제된 효소의 좋은 기질인 maltotriose 로부터 maltosyl 이나 D-glucopy ranosyl group이 전이될 수 있는데, 본 연구에서는 D정lucosyl transfer가 우세하였다

Bacillus macerans cyclodextrin glucanotransferase(EC 2.4.1.19: 1, 4-a-D(1, 4-a-glucano)-transferase, CGTase) was purified by the technique of starch adsorption and DEAE-cellulose column chromatography. The molecular weight of the enzyme was 67,000, consisting of a subunit. The enzyme converted starch into a-, B-, and r-CD in the relative amounts of 1:1.68:0.32, respectively. In the early reaction period, maltohexose was formed mainly by the coupling reaction of -CD with D-glucose and then other oligosaccharides. Maltotetrose was formed mainly from -CD in the initial stage of hydrolysis of the enzyme and then small amount of other oligosaccharides. Maltotriose was a good substrate for the enzyme and maltosyl or D-glucopyranosyl group can be transfered from this sugar. In this work, D-glutosyl transfer was premiered.

천연자원에서 향균성 물질을 찾고자 수종의 식용 식물을 검색하는 과정에서 쑥(Artemisia princeps var. orientalis)의 추출물이 항균활생이 비교적 높았다. 쑥의 메탄올 추출물을 겨l통분획한 ethyl acetate 분획물(EtOAc)은 agar diffusion법에셔 항균활성이 가장 높았으며, EtOAc로부터 분리된 화합물 중 0­C coumaric acid(200 -600ppm)는 B. subtilis(12.6 ~ -18.0mm)와 s. typmηwrium( 12.6-16.6mm)에 대하 여 우수한 항균활성을 나타내였고, 그 유도체인 p­C coumanc a디d는 약 1.2 -1.7배 정도의 항균활성을 증가시켰다 Coumaric acid의 3가지는 액체배양에 서 B. subtilis 증식응 모두 강하게 억제하였으며, S. typmmuriuη2, P. aeruginosa 및 s. aureus의 증식 억제에는 각각 0-, m- 및 p-coumaric a디d가 효과적 이었다. B. subtilis의 반고체 agar 배양에셔 pc coumaric acid의 MID는 100[?][?][?]200mug/disk였다.

Antimicrobial activity of methanol extract and fraction from mugwort leaves(Artemisia princeps val. orientalis) was investigated for the screening of natural antiwucroblal components. By using agar diffusion method, ethyl acetate(EtOAc) layer fractionated from methanol extract of mugwort leaves showed the highest inhibitory effects against tested microorganisms. The ortho-coumaric acid(200∼600ppm) isolated from EtOAc layer showed strong antibacterial activities for Bacillus subtilis and Salmonella typhimurium. As derivatives of o-coumaric acid, antibacterial activity of para-coumaric acid was 1.2∼1.7 fold higher than that of o-coumaric acid. Three types of coumaric acids strong inhibited the growth of B. subtilis in the culture medium. Growth of S. tyhimurium, P. aeruginosa and S. aureus were effectively inhibited by o-, m- and p-coumaric acids, respectively. Minimum inhibitory dose of p-coumaric acid for B. subtilis was 100[?][?][?]200mug/paper disk.

균류를 이용하는 생물공정의 생산성, 분리성, 유변 학적 성질에 영향을 주는 중요한 변수인 균류의 형 태를 fractal 차원을 사용하여 정량화하였다. 산업적 으로 중요한 균류인 Aspegillus oryzae와 Aspergil­l Ius niger가 초기의 접종 포자량과 탄소원의 농도를 변화시켜 액상배지에서 성장하는 경우, 디지탈 영상 분석장치를 사용하여 fractal 차원을 계산하였다. 균 사가 형성하는 구체의 특성과 fractal로 표현된 균사 의 형태와의 상관관계를 구하였다. 일반적으로 낮은 fractal 차원의 균사가 낮은 멜도(compactness)의 구체를 형성하고 외부의 모양이 불규칙적이었다.

The morphology of fungal growth, which is an important variable for separability and rheological property of fermented medium, was quantified with fractal geometry. Fractal dimensions were determined for submerged growth of two industrially important fungi, Aspergillus niger and Aspergillus oryzae. The tendency of pellet formation was related to the fractal dimension of fungi.

Cytodex III 마립담체를 이용하여 무혈청배지에서 인간선장 세포를 배양하였다. 무혈청애지에서 미립담체 표변에 세포들은 정상적으로 부착하고 확 산하면셔 세포들은 담체에서 담체로 이동하여 생육 하였다. 미립담체에 접착 수율은 1%의 혈청 을 포 함된 배지에서는 약 93%인 반면에 무혈청배지에 서는 85% 정도로 나타났다. 접착된 세포의 90% 이상이 유가식 및 연속배양에서 탐체의 표변에 접 착한 후 6시간 후에 확산하며 생육하였다. 유가식 배양에셔 서1포농도와 최대 scu-P A 농도는 각각 9.1x105 cells/m!와 1790 IU/ml이였고 연속배양에 셔는 각각 2.5x106 cells/m]와 1820 IU/ml로 나타났다. 또한 저혈청배지에셔는 scu-P A가 tc-P A로의 전환율이 10% 정도로 높은데 비교하여 무혈 청배지에서는 전환율이 4.8%로 낮은 것으로 나타났 다. 이처럼 무혈청배지는 저혈청배지에셔보다 낮은 tc-P A로의 전환율을 유지할 수 있는 이점이 었다.

Serum free medium was developed to cultivate Human Embryonic Kidney cells with Cytodex III microcarriers. The cells normally attached and spreaded on the microcarriers in serum free medium, and grew well by bead to bead processes. 85% of attachment yield was obtained on Cytodex III in this medium, compared to about 93% in 1% serum containing medium. About 90% of the attached HEK cells spreaded after 6 hours of post-attachment periods on the surface of microcarrier. Maximum cell density and scu-PA concentration in a serum free medium were 9.1x105 cells/ml and 1790 IU/ml, respectively, with fed-batch cultivation. Maximum cell density and scu-PA concentration in this medium with perfusion cultivation were 2.5x106 cells/ml and 1820 IU/ml, respectively. The conversion of single chain urokinase type plasminogen activator (scu-PA) into two chain type plasminogen activator (tc-PA) was less than 5% in a serum free medium compared to about 10% in 0.5% serum containing medium.

본 연구에서는 tyrosinase 효소반응시에 발생하는 반응 비활성화를 막아 조엽 얀정성을 향상시키는 것을 목적으로 연구를 수행하였다. Quinone에 의해 친핵성 공격을 받는 lysine기를 bifunctional rea gent인 glutaraldehyde로 변형시켜 줌으로써 효소 의 비활성화를 줄일 수 있었다. 또한, 고정화된 효소 를 충진층 반응기에 충진시켜 비활생화를 열으키는 생산물을 연속적으로 제거함으로써 효소의 얀정성을 크게 향상시켰다. 고정화 방법으로는 glass bead를 이용한 담체 가교법을 이용하였으며, 이때 glutaral­d dehyde와 효소의 lysine이 반응하게 되어 qumone 에 의한 친핵성 공격을 받지 않게 되어 안정성이 더욱 향상되 었다. 반응매 질로 borate buffer를 이용하 게되면 catechol과 borate의 복합체 형성으로 catechol에서 qumone으로의 전환이 줄어들게 되어 효소 비활성화가 감소하였다.

Tyrosinase has two types of enzymatic activities, cresolase catalyzing the hydroxylation of monophenol and catecholase catalyzing the oxidation of o-phenol. Gradual inactivation of the enzyme during the reaction is a barrier to be overcome for the commercial application of the enzyme. Tyrosinase was stabilized by modifying the lysine residue of the enzyme using glutaraldehyde. In addition to that, tyrosinase was also stabilized by adapting the continuous reactor system. In packed bed reactor quinone could be easily removed, so the stability of tyrosinase increased. Borate buffer retarded the reaction rate of catechol to quinone and consequently decreased the tyroslnase inactivation. Tyrosinase immobilizer on controlled pore glass showed significantly enhanced stability in a packed-bed reactor.

재조합 플라스미드 함유 효모 ha1Y2SUCSTA 의 glucoamylase의 분비효율은 배양 4연째에 약 74%이였으며 염색체 삽입 재조합효모 ha1Y2S­U UCSTA-I의 경우에는 4일째에 약 65%로 나타났다. 높은 분비효율을 나타낸 것은 glucoamy­I lase의 발현수준이 숙주세포 분비기관의 능력에 미치지 못하기 때문으로 추정된다. 두 재조합 균주에셔 모두 대부분의 세포내 glucoamylase는 c cytoplasm에 존재하고 약간의 부분만이 (10% 이내) 전 배양기간을 통하여 peri plasm에 존재하였다. 재조합 효모로부터 분비되는 glucoamy­1 lase의 특 생 을 Western blot 분 석 을 통하여 조사하였다. 배양액으로 분비된 glucoamylase는 매우 h heterogeneous하였고 그 분자량은 약 200에서 3 300 kilodalton이였다. 분비된 glucoamylase의 당 잔기량은 약 80% 이상이였고 세포내 glucoamy­l lase의 endoplasmic reticulum 형태는 약 55 에서 65kilodalton 사이의 여러 가지의 밴드로 나타났 다.

Secretion efficiency is generally affected by promoter, signal sequence, characteristics of foreign protein and host. Secretion efficiencies of glucoamylase in recombinant plasmid-harboring yeast and chromosome-integrated yeast which had STA signal sequences were 74% and 65% at the 4th day of incubation, respectively. The high secretion efficiencies of the yeasts were obtained due to the fact that the expression levels were not reached at the secretory apparatus capacities of the host yeasts. In both yeasts, most of the intracellular glucoamylase were detected in cytoplasm and small portion (below 10%) of glucoamylase were located in periplasm. The characteristics of secreted heterologous glucoamylase from recombinant Saccharomyces cerevisiaes were investigated by using Western blot analysis. The secreted mature glucoamylase was heterogeneous and its molecular weight was about 200 to 300 kilodalton. The carbohydrate content of mature glucoamylase was higher than 80%, and several bands of about 55 to 65 kilodalton indicate the endoplasmic reticulum forms of intracellular glucoamylase.