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KSBB Journal

간행물 정보
  • 자료유형
    학술지
  • 발행기관
    한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
  • pISSN
    1225-7117
  • 간기
    격월간
  • 수록기간
    2009 ~ 2013
  • 주제분류
    공학 > 생물공학
  • 십진분류
    KDC 476 DDC 576
제4권 제2호 (22건)
No
1

누에 번데기의 단백질 추출에 관한 연구

조철형, 차월석, 김종수

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.65-68

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

누에 번데기의 단백질 추출 조건을 규명하고자 온도, ph및 시간 변화에 따라 추출된 단백질의 총 질소함량을 Kjeldahl법과 원소 분석기를 이용한 결과는 다음과 같다. 1. 누에 번데기의 초단백질 : 23.34%, 조지방 : 15.61%이나, 2. 온도 변화에 따른 ph 4에서 1시간 추출시 60℃:6.76%, 80℃:7.94%, 100℃:8.67%이고 C.H.N corder의 분석결과는 60℃:8.08%, 80℃:9.52%, 100℃:9.72%로서 두 가지 방법에서 수치는 다르지만 온도 상승에 따라 수용성 질소계수가 증가하는 경향임을 알 수 있다. 3. pH변화에 따른 80℃에서 1시간 추출시 pH 4:7.94%, pH 6:8.96%, pH : 8:9.70%, pH : 10:10.67%, pH : 12:10.98%로 온도 상승과 같이 pH증가에 따라 증가하는 경향을 보이고 있다. 4.추출시간의 변화에 따른 100℃에서 pH 4인경우 1시간:8.67%, 2시간:9.23%, 3시간:9.76%이고, C.H.N. corder의 결과는 1시간:9.72%, 2시간:10.06%, 3시간:10.83%로서 추출 시간이 늘어남에 따라 증가되는 경향을 보이고 있다.

In order to determin the optimum extraction condition for protein in a Chrysalis of Silk Worm, Temperature, Time, and pH variation were conducted in the extraction. N.S.I. and nitrogen contents of the extracts in this condition were identified by Kjeldaha method and a C.H.N. corder. The results were as follows; Crude protein and crude fat contents in the extracts were 23.34% and 15.61%, respectively. N.S.I. values with respect to the temperature variation were 6.7% at 60℃, 7.94% at 8 and 80℃.67% at 100℃ in the condition of pH 4, 1 hr. N.S.I. values in pH variation were 7.94% at pH4, 8.99% at pH6, 9.70% at pH8, 10.19% at pH 10 and 12.16% at pH 12 in the condition of 80℃, 1hr. N.S.I. values in extraction time variation were 8.67% in 1hr, 9.23% in 2hr and 9.76% in 3hr in the condition of 100℃, pH 4. The tendency of N.S.I. variation in this extration condition was reconfirmed also by a C.H.N. corder.

2

Fermentation of Xylose to Ethanol by Pichia stipitis

I. S. Chung

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.69-73

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

Xylosw의 초기 농도가 2%, 4%, 8% 그리고 10%의 경우에 대하여 회분식 발효 실험을 하였다. 최대 ethanol수율은 2%, 4%, 8%과 10%의 xylose의 농도에 대하여 각각 0.46, 0.45, 0.43 그리고 0.42로 나타났다. Xylitol은 넓은 범위의 specific oxygen supply rate와 xylose 농도에서 거의 생성되지 않았다. 최대 specific productivity는 2-10%의 농도에 대하여 0.11, 0.11, 0.241, 0.0961g ethanol/hr-g DCW의 값을 보여주었다.

Batch fermentation runs were made with initial xylose concentrations of 2%, 4%, 8%, and 10%. The maximum yields were 0.46, 0.45, 0.43, and 0.42g ethanol/g xylose for 2%, 4%, 8%, and 10% xylose respectively. Xylitol formation was insignificant over a wide range of sepcific oxygen supply rates and xylose concentrations. The maximum specific productivities were 0.110, 0.110, 0.241, and 0.0961g ethanol/hr-g DCW for 2% through 10% xylose concentration

3

Ethanol Production from Xylose by Pichia stipitis Using Cell-recycled Bilreactor

Y. M. Park, I. S. Chung, C. Ronsick, Y. Y. Lee

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.74-77

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

Volumetric productivity를 향상시키기 위하여 미생물 재순환에 의한 연속 시스템을 이용하였다. 연속발효조의 연구에서 9.2g/1와 15.0,g/1의 범위의 세포 농도를 유지할 수 있었다. 4%의 xylose의 feed와 1.04g O2hr-g DCW의 specific oxygen supply rate의 조건에서 희석율이 0.0349 hethanol 수율은 0.36이었다. Ethanol volumetric productivity는 같은 희석율에서 0.244g/hr-ℓ로 증가하였으며 이것은 회분배양값의 260%이었다.

To increase the volumetric productivity a contimuous cell-recycled system was implemented. Cell concentrations between 9.2 and 15.0 g/1 were obtatined in the continuous fermentor study. At a 4% xylose feed and a specific oxygen supply rate(SOSR) of 1.04 g O2.hr-g DCW the ethanol yield was 0.36% at dilution rate. This represented a 26-% increase over that of th batch fermentation.

4

Biomass의 고효율 효소당화에 의한 적합한 Attrition Coupled Bioreactor개발에 관한 연구 ; Agitated Bead Type Bioattritor를 활용한 섬유소 당화

이용현, 박진서, 윤대모

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.78-86

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

에너지소모를 최소화하고 최대의 당화효과를 얻을 수 있는 고효율 당화장치의 개발을 목표로 impeller교반형 bioattritor를 설계, 제작하여 불용성 섬유소를 기질로 실험하였다. Bioattrotor의 효용성과 효소당화촉진 mechan-ism을 규명하였으며, 최적운전조건을 검토하였다. 분쇄 마찰매체함유 반응기에 일정한 탄성계수를 지닌 spiral spring coil을 내장한 torzue측정장치를 개발, 부하되는 torque, power, 그리고 소요에너지를 측정하여 이를 당화촉진과 비교함으로서 bioattritor의 경제성을 검토하였다. 분쇄마찰매체의 첨가량 및 종류, impeller형태, 교반속도는 중요한 요소로서 작용하였다. 비록 더 연구가 필요하나 분쇄마찰매체의 교반에 소모되는 동력은 당화 촉진효과의 증대에 따른 당화시간의 단축과 섬유소의 고효율 전환에 따른 고농도당의 확보등에 의해 보상되리라 예상된다

The effective saccharification of cellulosic biomass to glucose is the most critical step for the conversion of renwable biomass to alternative liquid fuel. The enzymatic hydrolysis of biomass can be significantly enhanced provide the attrition milling media is added during hydrolysis. The enhancing mechanism of hydrolysis reaction in an agitated bead system was investigated. An attrition-reactor (bioattritor) which installed specially designed torque measuring apparatus was developed, and the potimal saccharification conditions of bioattritor were determined. The relationship between the power consumption required for agitation of attrition-milling media and enhanced extent of hydrolysis of biomass was compared to evaluatic economic feasibility of the process

5

Biomass의 고효율 효소당화에 적합한 Attrition Coupled Bioreactor 개발에 관한 연구 ; Tumbling Drum Type Bioreactor를 활용한 섬유소 당화

이용현, 조구형, 박진서

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.87-93

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

불용성 기질인 섬유소의 고효율 효소당화에 적합한 분쇄마찰매체함유 반응장치의 개발을 목표로 섬유소-효소-분쇄마찰매체함유 반응장치의 개발을 목표로 섬유소-효소-분쇄마찰매체의 혼합액을 통자체를 회전시켜 교반마찰시키는 tumnling drum type bioreactor를 제작하여 그 효용성을 검토하였다. 반응조 내부의 구조 및 제반 운전조건하에서의 당생성 효울을 분쇄마찰매체의 교반에 소요되는 에너지와 비교분석 검토함으로써 공업적 규모의 활용을 위한 기술적, 경제적 타당성을 평가하였다. 3L규모의 장치의 경우 반응조내경과 baffle의 크기의 비가 1:0.05이고 8개의 baffle을 설치한 반응조에서 3mm glass bead를 600g/l로 첨가하여 100rpm으로 교반할 때 가장 우수한 결과를 얻었다. Tumbling drum type bioreactor는 매우 효율적인 attrition coupled된 당화장치로 판단되며, 특히 산업적 규모로 scale-up하기 용이한 구조를 갖고 있어 이에 대한 구체적 연구가 요망된다

To develop high dfficiency-low energy consumption attrition coupled bioreactor for enhanced enzymatic hyerolysis of insoluble biomass, a tumbling drum type bioreactor was installed, and its efficiency was evaluated. The effects of drum structure and poerational conditions were investigated. The optimal saccharification at 3L drum was obtained at 8 baffled drum, drum diameter to baffle height ratio of 1:0.05, 100rpm, and addition of 600g of 3mm glass bead per liter. The consumed power for rolling of drum and energy consumption for half digestion of cellulose were measured, and compared with enhanced rate and yield to predict the economic prospect of the process. The tumbling drum type bioreactor seems to have appropriated structure for industrial scale operation, and further investigation for scale-up need to be conducted.

6

Agrobacterium rhizogense에 Hairy Root 형성에 대한 생리학적 연구. III. 당근 세포에의 A. rhizogenes의 부착

황백, 황성진, 안준철, 조혜선

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.94-98

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

당근 진탕배양세포로부터 분리한 원형질체에 A.rhi-zogenes를 처리하여 bacteriad의 부착과 부착과정에 영향을 주는 여러 요인들을 조사하였다. 또한 당근뿌리 절편에 strain이 다른 bacteria와 heat-inactivated bacteria를 전처리한 후 A.rhizogenes strain A4를 접종하여 식물세포 표면에 있어서 bacterial specific receptor sites존재 유무를 살펴보았다. Bacteria의 부착은 pH 6.0, 24-35℃ 조건하에서 120분동안 원형질체막에 유의적인 증가를 나타내었으며, 또한 세포벽합성에 따르는 bacteriaqnckr의 영향은 볼 수 없었다. Strain이 다른 bacteria나 heat-inactivated bacteria의 전처리에 의한 A..rhizogenes의 당근조직에서 hairy root형성 억제 현상은 식물세포 표면에 specific receptor sites가 존재 한다기보다는 부착에 있어서 전처리한 bacteria의 경쟁적 저해작용으로 형질전환이 다소 억제되는 것으로 사료되어졌다

In vitro attachment experiments of bacteria to surface of host plant cell were carried out using C14 labeled cells of A. rhizogenes strain A4 and carrot protoplasts isolated from suspension culture of cells. Protoplasts were cocultivated with A. rhizogenes at various times after their isolation. Attachment kinetics showed that adherence of bacteria to protoplasts attained a maximum level within 120mins of co-cultivation. Maximum attachment occured at pH 6.0 and 24-35℃. Bacterial attachment was observed at botg carrot cells with and without primary cell wall. The inhibition of transformation on the carrot root discs by A. rhizogenes was observed when non-related strain and heat inactivated bacterial strain cells were pretreated.

7

Saccharification of Hardwood Hemicellulose by Solid Acid

S. B. Kim, Y. Y. Lee

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.99-103

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

활엽수의 헤미셀룰로오스를 autohydrolusisgkdu 얻은 용액을 초강 산고체, Nafion을 사용하여 2차 가수분해시키는 반응에 관한 Kinetics를 고찰했다. 연속 column반응기를 사용해 얻을 수 있는 최대 xylose수율은 약 90%이였다. 양이온 물질이 제거된 feed를 사용하면 Nation은 안정된 가수분해 촉매를 사용될 수 있음이 판명되었다.

The kinetics of secondary hydrolysis of hemicellulose prehydrolyzate by a solid superacid, Nafion, was investigated. The maximum attainable xylose yields determined from continuous column reactor operation were about 90%. Nafion was found to be a stable hydrolytic catalyst provided that the feed solution was free of cationic substances.

8

Studies of Attachment of Fibroblasts on Microcarriers for the Production of Tissue Plasminogen Activator

Jae K. Kang, Hyung H. Park, Hyeon Y, Lee

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.104-109

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

접착 세포용으로 가장 많이 쓰이고 있는 미립 담체들의 다섯가지 종류를 소 혈청, 말 혈청 및 무 혈청 배지에 섬유 세포를 배양한 결과 collagen으로 싸여진 CytodexIII이 가장 좋은 접착성을 나타냈으며, 세포 성장 및 TPA 생산성도 우수했다. 소 혈청을 함유한 배지가 95%의 가장 좋은 접착율을 나타냈으며 무혈청 배지가 75%로 낮은 접착도를 보였다. 하지만 연속 배양(Perfusion Chemostat)시 TPA의 생산성은 말 혈청을 함유한 배지 및 무 혈청 배지가 각각1.2 ug/ml, $0.7ug/ ml 으로 더 높았으며, 이때 세포의 농도는 각각 5.5x106cells /mL 와 0.7x106cells /mL였다.

Among commercially available five different types of micro-carriers, collagen coated Cytodex III supports the best cell growth and production of Tissue type Plasminogen Activator from fibroblasts for all three various kinds of media(FBS, horse serum containing and serum free medium). 95% of attachment yield is obtained with Cytodex III in FBS containing medium compared to about 70% in serum free medium. However, higher production of TPA can be observed in horse serum containing and serum free media as 1.2 ug/ ml and 0.7ug/ ml, respectively with 5.5x106 cells/ ml and 0.7x106 cells/ ml under perfusiom chemostat operations.

9

고정화 미생물의 기질 유효 확산

김광, 선우양일, 박승조

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.110-117

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

Ca-alginate에 의하여 포괄된 고정화 Zymomonas mobilios의 담체내부에 있어서 균체자체활성을 물질이동 현상으로 규명하고자 하였다. 또한 균체활성을 장기간 유지할 수 있을때 기질의 유효확산에 다른 반응속도를 고찰하여 균일상계로의 균체량농도를 결정할 수 있는 고정화 최적화를 구하고 그 활성의 변화에 대한 경향을 비교검토하였다. 반응속도와 균체량의 관계가 이론치에 잘 일치되므로써 기질의 유효확산계수, De 와 고정화균체량, Cc 의 상관관계를 결정할 수 있었고 이로부터 고정화 균체량 250g-dry cell/ l에서 공극율 0로 될 수 있음을 알 수 있었다. 실험치의 결과는 Michaelis-Menten형반응의 0차와 1차사이를 만족하였다

The fiffusion characteristics of substrate of varing biomass concentrations into and from Ca- alginate gel beads in well-stirred solutions were investigated. Ca-alginate gel beads were immobilized by Zymomonas mobilis or free from cells. The values of the diffusion coefficient of substrate were calculated by means of the method of Least squares and Random pore model. Reaction rates are expressed by the Michaelis-Menten type equation, and the results are compared with experimental data. Intraparticle effective diffusivity of substrate resistance on reaction by using immobilized Z.mobilis entrapped by Ca-alginated gel seemed to be restricted by cell density. The experimental data also indicated relationship between the effective diffusivity and the cell concentration used in the gel preparation

10

Computer-coupled Mass Sepctrometer를 이용한 세포증식과 기질소모의 연속적 On-line추정

남수완, 김정희

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.118-122

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

Candida utilis를 model균주로 하여 세포증식과 기질소모를 on-line 간접측정하고자 개인용 컴퓨터(IBM PC-AT)와 interface된 quadrupole mass spectrometer로 발효 배기가스를 분석하였다. 5분마다 연속적으로 분석되는 질소, 산소, 이산화 탄소 및 수증기의 mole백분율(%)로부터 산소 소비속도(OUR)와 이산화 탄소 발생속도(CER)를 on-line으로 계산하였다. 미리 실험 결과치로부터 결정한 maintenance와 수율 상수들(K1K2 값을 이용하여 세포농도와 기질인 포도당의 농도를 on-line으로 간접추정하였다. 간접추정된 값들은 실험적으로 측정한 세포농도 및 기질농도와 잘 일치함을 알 수 있었다

From the on-line mass spectrometric analyese of the exhaust gaseous composition of fermentor and the material balance equations for oxygen and carbon dioxide, oxygen uptake rate (OUR) and carbon dioxide evolution rate (CER) were calculate using a personal computer (IBM PC-AT) interfaced to a quadrupole mass spectromter. The calculate OUR and CER were used for the indirect estimation of cell and substrate concentrations during the batch culture of Candida utilis. For the estimation of sustrate concentration, the yield model of Pirt was applied. It was found that the cell and substrate (glucose) concentration could be ssatisfactorily estimataed and the results showed the more accurate estimations of both fermentation state variables when OUR data were used than CER data.

11

Separation of Soybean Trypsin Inhibitor Using Reverse Micellar System

Sang-Woo Jo, Choon-Soon Choi, Joon-Shick Rhee

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.123-127

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역미셀계를 이용하여 대두 트립신 저해제의 분리에 대하여 고찰한 바, 여러 완충 수용액 중에서 1.0M $CaCI2용액(pH3.0)과 1.0M NaCl용액(pH 11.5)이 단백질의 용해와 회수에 가장 적당하였다. 이 조건을 두 모델계와 하나의 실제시료에 적용해 본 결과, 7S 단백질과 트립신저해제로 구성된 모델계에서는 비활성이 두배이상 증가되었고, 선수용성 단백질과 트립신 저해제로 구성된 모델계에서는 1.6배의 비활성 증가를 볼 수 있었다. 광교대두로부터 추출한 전유출물의 경우, 1.56배의 비활성 증가가 있었다. 이들을 SDS-PAGE로 확인한 결과 모두 매우 순수한 단백질임을 알 수 있었다

The separation of trypsin inhibitir using reverse micellar system was invertigated. Among the biffer system tested, 1.0M CaCI2 solution (pH 3.0) and 1.0M NaCl soluation (pH 11.5) were most effective for solubilization and de-solubilization of protein, respectively. When these conditions were applied to two model sampeles, one of which was composed of the same amount of 7S protein and trpsin inhibitor, and the other of which was composed of the same amount of soluble soybean protein isolates and trypsin inhibitor, highly pure trypsin inhibitor was obtained. And in the real soybean, Kwng Gyo, pure trypsin inhibior was also obtained.

12

Bacillus licheniformis에 의한 단백질분해효소 생산 Kinetics

김진현, 유영제

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.128-133

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미생물에 의한 단백질 분해 효소인 protease생산에 있어 탄소원과 질소원의 영향은 매우 중요한 것으로 알려져 있다. Bacillus licheniformis에 의한 protease생산에 있어서 탄소원과 질소원의 영향을 규명하기 위해서 제한배지를 사용하여 회분식 배양을 수행하였다. 탄소원의 농도가 높을수록 그리고 질소원의 농도가 높을수록 Bacillus licheniformis의 성장은 촉진되나 proteased의 생합성 비율은 감소됨을 알았다. 또한 회분식 배양 결과로부터 탄소원과 질소원의 영향을 고려한 수학적 모델식을 제안하였으며 제안된 수학적 모델식을 사용하여 탄소원과 질소원을 적절히 공급하므로서 protease의 생산성을 증대시킬 수 있었다

Carbon sources and nitrogen sources are known to be very important in protease production by microorganisms. The effects of carbon source and nitrogen source on protease biosynthesis by Bacillus licheniformis were investigated using batch cultures. As initial carbon and nitrogen concentrations of culture medium increased, the specific growth rate of Bacillus licheniformis was increased, while the specific protease production rate was decreased. From the results of batch cultures, a mathematical model which considers the effects of carbon source and cnitrogen source was proposed and the methods to increase the productivity of protease were discussed.

13

Aureobasidium pullulans 에 의한 Exopolysaccharide 生産 - 멜라닌 색소의 출현에 관한 연구 -

金在亨, 李基永, 姜成弘

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.134-142

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Aureobasidium pullulans에 의한 세포외 다속류 생성연구를 통한 결론은 다음과 같다. (1) sucrose 농도가 50 g/l 이상일 때는 기질에 의한 저해 작용이 나타나고 있음을 알았으며 실소원의 증가에 따라서 균체량은 증가하지만 세포외 다속류 생성은 최적농도 (1 g/l )까지 증가하고 그 이상에서는 감소했으며 멜라닌 색소 출현시간은 길어졌다. (2) 최대 균체 성장은 초기 pH 3.0에서 보인 반면에 세포외 다속류 생성은 초기 pH 7.5에서 최대 값은 나타내었고 최대 PH가 증가함에 따라서 효모형 비율이 증가했으며 멜라닌 색소 출현시간은 pH 4.5~8까지는 거의 일정하게 나타났지만 pH 3 이하에서는 전혀 멜라닌 색소가 나타나지 않았다. (3) 탄소원과 실소원을 증가시켰을 때 pH 5 이하에서는 멜라닌 색소는 나타나지 않았으나 pH 6에서 pH 8.5 로 pH가 높아짐에 따라 멜라닌 색소는 빨리 나타나는 경향을 보였다. (4) 용존산소 농도가 높을수록 균체량과 세포외 다속류 생성이 증가했고 멜라닌 색소 출현시간이 빨라졌으며 potassium phosphate가 전혀 들어있지 않는 배지에서는 멜라닌 색소 출현은 관찰할수가 없었다.

In exopolysaccharide fermentation by Aureobasidium pulluans, the effects culture conditions (concentration of nitrogen, potassium phosphate, dissolved oxygen, and initial pH) on the production of exopolysaccharide and the appearance of melanin pigment were investigated. The results are as follows. (1) The specific growth rate and the specific production rate of exopolysaccharide were inhibited by substrate when the carbon source concentration higher than 50g / ℓ and the cell growth increased with increases of nitrogen source but exopolysaccharide production decreased with the nitrogen concentration when it become greater than 1 g / ℓ . (2) The maximum cell growth and the maximum exopolysaccharide production were obtained at initial pH values of 3.0 and 7.5 respectively. As the initial pH increased, the yeast-like cells increased and the increased of dissolved oxygen increased the cell growth and exopolysaccharide production. (3) As the concentration of dissolved oxygen is increased or the concentration of nitrogen source is decreased, the period of melanin pigment appearance becomes shorter and the melanin pigment never appeared when the initial pH was less than 3.0 or the potassium phosphate was not added.

14

세포 침전장치를 이용한 하아브리도마 세포의 고농도 배양

최대부, 조보연

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.143-149

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

하이브리도마 세포를 고농도 배양하기 위하여 세포 침전장치를 고안하여 사용하였다. 위로 올라갈수록 직경이 넓어지는 침전조는 세포의 침전이 잘 일어나지만 침전된 세포가 침전조 벽에 누적되는 결점을 보였고, 아래 위의 직경이 균일한 침전조는 희석율이 높아질수록 유출되는 세포가 증가하는 문제점을 나타내었다. 특히 유출되는 세포속에는 dead cell 보다 viable cell의 비율이 높아 배양기 내의 dead cell이 급격히 농축되는 현상을 보였다. 그러나 침전조를 적절히 고안하여 세포 누적 현상을 막고 동시에 세포 유출을 완화시킬 경우 세포농도 5x106 cells/ ml에서 일주일간 배양이 가능했다. cell viability의 측정이 용이하므로 침전조를 이용한 하이브리도마 고농도 배양의 특성을 연구하는데 많은 도움을 줄 수 있을 것으로 판단된다.

A cell sedimentaion system was designed and employed for the high culture of hydridoma. An upward divering cell settler allowed a good sedimentation of hybridoma but the accumulation of cell mass on the settler's wall side was a potential prolem. Although a cyinderical cell settler was useful to solve this problem, this device was employable only at low dilytion rate. A modified cell settler could support the high density culture of hybridoma at a concentration of 5x106 cell/ ml during 1 week, producting 380mg of monclonal antibody.

15

A Strady-State One-Dimensional Analysis of an Oxygen Electrode in Stationary and Flowing Liquid

Tae-Jin Kim

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.150-156

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

안정상태 일차원적 모델을 이용하여 막으로 덮힌 상업적인 산소 적극의 특성을 공기포화된 식염수에서 연구하였다. 전극은 세 개의 층으로 이루어져 있는데. 이는 외부 농도 경계층(용액), 반투성 막, 내부 전해질 용액 층으로 구분된다. 정체용액에서, 물은 외부 용액층으로부터 내부 전해질 용액쪽으로 열역학적 평형을 이룰 때까지 이동한다. 한편 유동 용액에서, 불은 수력학적 압력차 때문에 전해질 층의 두께가 막의 두께와 같아질 때까지 반대방향으로 이동한다.

The chaacterisitics of a commercial membrance-coverd electrode in air-saturated saline solution were investigated in terms of a steadystate one-dimensional model. The electrode system miiersed in an aqueous medium consists of three layers: an external concentration boundary layer, a membrance, and an inner electrolyte layer. The membrance can be permeabld to the water and impermeable to the ionic species. In stationary midium, the water migrates from the external medium to the inner electrolyte layer until a thermodynamic equilibrium is reached. In a following midium, however, there is a reverse direction of water movement due to the hyrodynamic pressure differential until both thickness of the electrolyte layer and the membrance are equal.

16

참조기의 아미노산 분리정량

차월석, 김종균, 김연순

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.157-161

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조기의 유리 아미노산, 총 아미노산의 조성을 규명하기 위해 HPLC를 사용하여 분리정량한 결과와 조지방, 조단백의 결과는 다음과 같다. 1. 조지방 함량은 조기 가식부 : 2.35%, 조기 어란 : 3.65%이고, 조단백질은 조기 가식부 : 46.92%, 조기 어란 : 67.40%로서 다른 어류보다는 조지방은 적으나 조단백질은 비슷하다. 2. 유리 아미노산의 총 함량은 조기 가식부가 323.0mg/100g, 조기 어린이 932.5mg/100g으로 조기 어란이 더 많이 함유되어 있다.

The contents of total amino acid and free amino acid in the protein of yellow corvenia were analysed quantitively by HPLC. The results were as follow; The contents of free amino acid of yellow corvenia flesh and yellow covenia roe were 323.0mg/100g and 932.5mg/100g, respectively. The contents of total amino acids of yellow corvenia flesh and yellow covenia roe were 33,2620.0mg/100g and 64,861.0mg/100g, respectively. The contents of essential amino acid of yellow corvenia flesh and yellow corvenia roe were 12,196.0mg/100g and 13,143.0mg/100g, respectively.

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Comparative Studies on Streptomycin Producing Strains and Media

Kong Hwan Kim, Young Ae Joe, Seok Rae Choi, Yang Mo Goo

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.162-166

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스트렘토마이신 생산균주들인 Streptomyces griseus와 S.galbus strain들은 tryptic soy (TS) broth에 배양하여 항생제 생산을 조사하였을 때 S. griseus ATCC 27001이 가장 좋은 균주로 나타났다. 또한 S. griseus ATCC 12475와 ATCC 23345에서도 생장과 항생물질의 생산이 뛰어난 것으로 나타났다. 문헌에 보고된 streptomycin 생산배지들을 조사하여 본 결과 glucose-soybwan meal-sodium chloride (GSS) broth와 K (Chucken) broth에서, 조사한 다른 배지들에 비해 더 많은 양의 스트렙토마이신이 생성되었다. 이들 배지에 든 성분 중에 콩속에 든 특정한 성분이 스트렙토마이신의 생성을 활성화 시켰다. Meat extract를 soybean meal과 함께 가하여 주면 항생제 생성이 더 증가되었다. distillers' solubles도 meat extract와 유사한 활성이 관찰되나 com steep liquor를 가하여 주면 항생제 생산이 감소되었다

When various strains of Streptomyces griseus and S. galbus were examined for the ability on the production of streptomycin in tryptic soy(TS) broth, S. griseus ATCC 27001 was found to be the best. S. griseus ATCC 12475 and ATCC 23345 showed also good growth and favorable production of streptomycin. Examination of various complex media reported in fermentation literatures for the industrial production of streptomycin indicated that glucose-soybean media-sodium chloride (GSS) broth and K (Chucken) broth gave higher yields of streptomycin than others studied by us. Examination of the ingredients of media producing streptomycin in high yield indicated that some components in soybean activated the production of streptomycin. Addition of meat extract enhanced the yield of streptomycin but it could be substituted with distillers solubles without much effect on the yield. Addition of corn steep liquor decreased the production of streptomycin.

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알콜발효에서 효모의 에탄올 내성 조건-발효온도와 기질종류에 대한 연구

김형진, 유연우

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.167-171

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Glucose와 lactose를 이용한 알콜발효에서 Sacchar-omyces cerevisine STV89와 Kluyveromyces fragilis CBS397의 에탄올 내성에 대한 발효온도의 영향에 관한 연구를 수행하였다. 최대 비성장 속도와 에탄올 생성 속도는 발효온도에 따라 35℃까지 증가하였으나 최대 cell 농도와 에탄올 농도는 발효온도 증가에 따라 감소하였다. Cell viability도 역시 발효온도가 낮을수록 향상되었다. 따라서 수행한 실험조건에서 효모의 에탄올 내성은 25℃에서 가장 우수하였다. 균주의 비교에서 에탄올에 대한 내성이 S. cerevisiae가 K.fragilis보다 동일한 실험조건에서는 더 우수하였으며, 탄소원의 종류에 대한 비교에서 K. fragilis의 에탄올에 할 때보다 더 우수하였다

The alcohol fermentation using glucose and lactose was carried out to study the effect of fermentation temperature on the ethanol tolerance of Saccharomyces cerevisiae STV89 and Kluyveromyces fragilis CBS397. The maximum specific growth rate and ethanol production rate were increased up to 35℃ with the fermentation temperature, although maximum ethanol and cell concentration were decreased by increasing the fermentation temperature. The cell viability was also improved by lowering the fermentation temperature. Under the experimental conditions, the best ethanol tolerance of yeast strains was obtain at 25℃. The ethanol tolerance of S. cerevisiae is better than that of K. fragilis at the same fermentation condition. With respect to the carbon source, glucose is found to be more favorable for ethanol tolerance of K. fragilis than lactos.

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알콜발효에서 효모의 에탄올 내성 조건-통기와 lipid첨가에 대한 연구

김형진, 장형욱, 유연우

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.172-176

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Saccharomyces cerevisiae STV89와 Kluyveromyces fragilis CBS397의 에탄올 내성에 대한 산소와 불포화 지방산의 첨가 영향을 연구하기 위한 알콜발효를 수행하였다. 실험결과 통기에 의하여 세포성장과 에탄올 생성속도가 촉진되어으며, 세포와 에탄올 생성량도 크게 증가되었다. 특히 균주의 비교에서 cell의 최대 비성장 속도와 에탄올 생성 속도가 S.cerevisiae의 경우 1.7배와 2.3배 증가하였지만, K. fragilis인 경우 6.4배와 4.4배가 증가하여 K. FRAGILIS가 에탄올 생성 및 cellgrowth를 위하여 S. cerevisiae보다 산소가 더 필수적인 요인으로 작용한다. 또한 S. cerevisiae와 K. fragilis 모두 ergosterol, linoleic acid 및 oleic acid의 첨가에 의하여 cell growth와 에탄올 형성이 향상되었다. 따라서 산소와 불포화 지방산은 효모의 에탄올 내성 증가에 중요한 요인으로 작용함을 알 수 있었다.

The alcohol fermentation was carried out to study the effect of aeration and unsaturated fatty acids added on the ethanol tolerance of Saccharomyces cerevisiae STV89 and Kluyveromyces fragilis CBS397. The cell growth rate and ethanol production rate was stimulated by aeration and the cell mass production and ethanol production were also substantially improved. With respect to strains, the maximum specific growth rate and overall ethanol productivity of K. fragilis under aerated condition were 6.4 fold and 4.4 fold higher than those of strictly anaerobic condition, although those of S. cerevisiae were increased 1.7 times and 2.3 times by aeration. The addition of ergosterol, linoleic acid and oleic acid also improved the cell growth and ethanol production of S. cerevisiae and K. fragilis. Thus it was found that oxygen and unsaturated fatty acids added played a decisive role on the increase of ethanol tolerance of yeast strains.

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Cross-Flow Filtration에 의한 항생물질 생산 균사체의 분리

정상철, 윤종원, 전영중, 조영제, 이재흥

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.177-184

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항생물질 발효액의 균사체 분리에 있어서 Modified regenerated cellulose 막을 이용한 Cross-flow filtration으로 높은 Flux를 얻을 수 있었다. 막분리시 가급적 높은 유속, 높은 온도, 특정 균사체농도(약 20% PMV)에서 높은 Flux를 보여주었으며 Fouling 정도는 균사체 농도가 높을수록 또한 유속이 낮을수록 심각한 것으로 나타났다. 발효액을 농축 분리할 때의 Flux profile은 1단계 Sublayer형성에 의한 급속감소, 2단계 평형, 3단계 Fouling에 의한 급속감소의 세 구간으로 나눌 수 있었으며 Diafiltration의 적용으로 3단계의 Flux 감소 현상을 현저히 완화시킬 수 있었다. 한편 Diafiltration에 의한 항생물질 회수시 초기부터Diafiltration하는 것보다는 특정 PMV까지 농축시킨 후 Diafiltration하는 경우에 작업시간과 여액의 Volume을 최소화 할 수 있었으며 본 실험에서는 98%의 회수율을 얻기 위해서 Di-afiltration을 시작하는 Optimum PMV는 20%였다.

In separating mycelia from antibiotic fermentation broths, high permeate flux was obtained by cross-flow filtration using modified regenerated cellulose membrane. The flux was increased most effectively by increasing the flow rate. There existed a critical mycelium density (about 20% PMV) at which the highest flux was observed. In a batchwise concentration of the fermentation broth, the system suffered from a severe fouling problem, which was relieved drastically by applying diafiltration technique, although it increased the permeate volume. A combined concentration/diafiltration process was ideal in keeping relatively high flux together with a high product recovery yield. The best result was obtained by starting diafiltration after concentrating the broth to 20% PMV. By doing so, a 98% product recovery yield was achieved in the shortest time while keeping the permeate volume at a minimum level.

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반 연속식 배양에 의한 효모 K. fragilis의 알콜발효 특성에 관한 연구

허병기, 류장수, 목영일

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.185-190

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K. fragilis를 이용한 돼지감자의 반연속알콜발효에서 유효희석속도 및 주입기질 당농도의 변화가 정상상태에서의 알콜농도 및 알콜생산성에 미치는 영향을 시험을 통해 규명하였으며 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 주입기질의 치환시간 간격을 1시간을 했을 경우 유효희석속도는 비증식속도와 일치하여 연속발효실험의 희속속도와 같음을 알 수 있다. 유효의석속도가 0.425hr-1에서도 wash out이 발생되지 않았으며 최대 알콜 생산성은 5.5g/l.hr이였고 이 경유 유효희석속도는 0.25hrhr-1, 주입기질의 당농도는 85g/lsowl 135g/l사이에 분포되어 있다.

Semicontinuous alcohol fermentation of Jerusalem Artichoke by K. fragilis CBS 1555 was performed to investigate the effect of the effective dilution rate and influent sugar concentration to the ethanol concentration and alcohol productivity at steady state. When the time interval for the replacement of fresh influent with fermentation broth was less than or equal to 1 hr, the effective dilution rate was found out to be equal to the specific growth rate. Wash out was not occurred until the effective dilution rate, 0.425 hr-1, and the maximum alcohol productivity was around 5.5 g/1·hr. In this case, the effective dilution rate was 0.25 hr-1 and the influent sugar concentration was distributed from 85 g/l to 135 g/1.

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효모 S. cerevisiae의 돼지감자 알콜발효 특성과 발효시간과의 함수관계

허병기, 김현성, 목영일

한국생물공학회 KSBB Journal 제4권 제2호 1989.07 pp.191-196

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초기 당농도 50, 79, 110, 190 및 250g/l 각 각에 대한 S, cervisiae SIV-89이 돼지감자 알콜발효특성(비생장속도, 비생성속도, 알콜생성율, 균체생성율, 알콜전환율, 알콜농도의 영향)을 시간의 함수로 규명하여 보았다. 최대 비증식속도 및 최대 알콜 비생성속도는 초기당농도 70내지 80g/l까지는 증가하여 최대값 0.35와 1.98을 나타내었으나 그 이상에서는 감소하였다. 또한 최대 비증식속도 및 최애 알콜 비생성속도가 나타나는 시간은 초기 당농도 증가에 따라 점차로 지연되는 현상을 나타내었다. 균체생성율 Yx/l알콜생성을Yp/1의 최대값은 0.15, 0.45이였으며 초기 당농도 증가에 따라 감소 겨향을 나타내었다, 당의 알콜 전환율은 당농도의 증가에 따라 감소하여 당농도 190g/l 이상에서는 70%이하로 떨어졌다. 또한 발효기질 내의 알콜농도가 증가하면 균주의 대사활동이 감퇴되어 알콜농도 70내지 80g/l에 이르게 되며 잔여당농도에 관계없이 균체의 성장 및 알콜 생성이 완전히 중지되는 현상을 나타내었다.

Functional relationship between the Fermentation characteristics of Functional relationship between the Fermentation characteristics of S. cerevisiae SIV-89 and the fermentation time was investigated. According to the increase in the initial sugar cone. from 50g/L to 80 g/L, maximum specific growth rate and maximum specific alcohol production rate were increased until 0.35 and 1.98. But the two values were decreased with increase of initial sugar cone. in the region of more that 80 g/L. Maximum alcohol yield and biomass yield were 0.45 and 0.15 respectively. However those vlaue were found to be reduced with the argument of initial sugar concentration. Sugar conversion was decreased with sugar concentration. When the sugar concentration was more than 190 g/L, the conversion was dropped below 70%. The increase of alcohol concentration in the fermentation broth induced the phenomenon of decline of metabolism. In case of more than 80 g/L of alcohol conc., biomass growth and alcohol production were completely stopped regardless of remaining sugar concentration.

 
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