Purpose: This study aims to investigate the inhibitory effect and regulatory mechanism of melanin biosynthesis in mouse-derived B16 melanoma cells (B16F10), using a light emitting diode (LED) light source irradiation device of three single wavelengths (630, 470, 525 nm) for irradiation of visible light (green, red, blue). Methods: Using three single-wavelength LED light sources, cytotoxicity, tyrosinase activity, and melanin biosynthesis were measured. Results: LED irradiation with green, red, and blue wavelengths did not show cytotoxicity or changes in melanin content at each wavelength. When the wavelength was irradiated alone, the blue and green LED wavelengths caused a decrease in tyrosinase activity, blocking the intracellular signaling mechanism that caused the increase in tyrosinase activity induced by α-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH). In addition, protein kinase A cascade, an intracellular signaling mechanism that causes an increase in tyrosinase activity induced by α-MSH, was blocked, as it was inhibited with cyclic adenosine monophosphate (cAMP). Red series wavelength LED did not lead to any reaction. Conclusion: The irradiation of blue and green series wavelength LEDs among visible lights controls the mechanism involved in melanin formation in skin cells and results in skin whitening, which suggests that it can be effective in the whitening and cosmetic industry using LED in the future.
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목적: 본 연구는 가시광선(녹색, 적색, 청색)조사를 위한 세가지 단일 파장(630, 470, 525 nm)의 LED 광원 조사장치를 활용하여 mouse 유래 B16 melanoma cell (B16F10)에서 멜라닌의 생합성 저해 효과 및 조절 기전을 규명하고자 하는데 있다. 방법: 세가 지 단일 파장의 LED 광원을 이용하여 세포독성, tyrosinase 활성도 측정, melanin 생합성도 정도를 확인하였다. 결과: 녹색, 적색, 청색 계열 파장의 LED 조사는 각 파장에서 세포독성이 나타나지 않았으며, 멜라닌 함량은 변화가 없었다. 파장을 단독 조사하였 을 때 청색 및 녹색 계열 LED 파장은 tyrosinase 활성 감소를 일으켜, α-MSH에 의해 유도된 tyrosinase 활성 증가를 일으키는 세 포 내 신호전달 기전을 차단하였다. 또한 α-MSH에 의해 유도된 tyrosinase 활성 증가를 일으키는 세포내 신호전달 기전인 protein kinase A cascade를 cAMP로 억제함으로써 차단하였다. 적색 계열 파장의 LED는 반응이 나타나지 않았다. 결론: 가시광선 중 청색 및 녹색 계열 파장의 LED의 조사는 피부 세포에서 멜라닌의 형성에 관여하는 메커니즘을 조절하고 피부 미백의 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였고 향후 LED를 이용한 미백 및 향장 미용 산업에서 효과적일 수 있음을 시사한다
Abstract Introduction Methods 1. LED광원 및 조사 2. B16 melanoma cell 3. 시약 및 기기 4. MTT assay 5. B16 melanoma cell내의 tyrosinase 활성도 및 melanin생성량 측정 6. α-MSH에 의한 tyrosinase 활성 및 과생성 melanin에 미치는 영향 7. 통계처리 Results and Discussion 1. α-MSH 에 의한 멜라닌 생합성량 확인 2. α-MSH 에 의한 tyrosinase 활성 변화 확인 3. 가시광선(green, red, blue)조사에 의한 세포 독성 확인 4. 가시광선(green, red, blue)조사에 의한 melanin 생합성도 변화 확인 5. 가시광선(green, red, blue)조사에 의한 tyrosinase 활성 변화확인 6. 가시광선(green, red, blue)조사에 의한 세포내 cAMP 수준 변화 확인 Conclusion References 국문초록 中文摘要