Purpose: This study aimed to determine the skin anti-inflammatory effect of brazilin on RAW264.7 cells. Methods: To determine anti-inflammatory effects of brazilin on RAW264.7 cells, we measured cell viability, gene expressions, and prostaglandin E2 (PGE2)/nitric oxide (NO) production. Results: Cells were treated with brazilin to confirm cytotoxicity; no toxicity was observed when cells were treated at a concentration of ≤1 μg/mL. In RAW264.7 cells, the number of intracellular granule were increased after lipopolysaccharide (LPS) treatment; however, brazilin treatment decreased intracellular granules similar to that in the control group. In this research, we elucidated the anti-inflammatory effects of brazilin on the mRNA expression of interleukin 1 alpha (IL1α ), interleukin 1 beta (IL1β ), interleukin 6 (IL6 ), and tumor necrosis factor alpha (TNFα ) and PGE2/NO production. Real-time reverse transcription polymerase chain reaction (real-time RT-PCR) showed that brazilin administration increased the mRNA levels of IL1α /IL1β /IL6 /TNFα genes, and analysis of PGE2/NO also revealed that brazilin induces anti-inflammatory effects. Conclusion: We identified the anti-inflammatory effect of brazilin, and found that brazilin can be a potent cosmetic ingredient for anti-inflammatory agent for atopic dermatitis. Based on this result, we believe that brazilin has the potential to be used in not only cosmetics, but also medicine or healthcare food.
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목적: 본 연구는 브라질린에 의한 RAW264.7 세포의 항염 효과를 확인하기 위하여 수행되었다. 방법: 브라질린이 RAW264.7세포 에 항염효과를 나타내는지 확인하기 위하여, CCK-8 실험법을 통한 세포생존률 측정, 실시간 유전자 중합효소 연쇄반응을 통한 싸 이토카인의 유전자 발현양상, 효소결합면역흡착검사법을 통한 PGE2와 산화질소의 생성 정도를 확인하였다. 결과: RAW264.7 세 포에 브라질린을 처리하여 세포독성을 확인한 결과, 1 μg/mL 이하의 농도로 처리시 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다. RAW264.7 세포는 LPS 자극에 의해 세포질 내 소과립이 증가되나 브라질린을 처리하면 대조군과 유사하게 세포질 내 소과립이 감 소하는 경향을 보였다. 본 연구를 통해 브라질린이 인터류킨1α (interleukin 1α, IL1α), 인터류킨1β (interleukin 1β, IL1β), 인터류킨 6 (interleukin 6, IL6), tumor necrosis factor α (TNFα) 유전자의 발현을 감소시킴을 확인할 수 있었다. 또한 산화질소의 생성을 감 소시키고 PGE2의 생성을 감소시킴을 통해 브라질린의 항염효과를 확인할 수 있었다. 결론: 본 연구를 통해 브라질린의 항염효과를 확인하였고, 브라질린이 항염 및 아토피를 타겟으로 하는 화장품 원료로서의 가능성을 제시하였다. 브라질린이 피부미용, 화장품, 건강식품 등의 산업 등에도 응용될 수 있을 것으로 여겨지며 그 가능을 확인하기 위해 브라질린이 염증세포에 미치는 기전연구가 필요할 것으로 보인다.
Abstract Introduction Methods 1. 세포배양 2. 세포 생존율 검증 3. 실시간 유전자 중합효소 연쇄반응(Real-time RT-PCR) 4. NO 정량 5. PGE2-효소결합면역흡착검사법 6. 통계분석 Results & Discussion 1. 브라질린의 농도별 세포 생존율 분석 2. 브라질린이 RAW264.7 세포의 형태에 미치는 영향 3. 브라질린이 NO 생성에 미치는 영향 4. 브라질린이 PGE2의 생성에 미치는 영향 5. 브라질린이 염증성 싸이토카인의 생성에 미치는 영향 Conclusion Acknowledgements References 국문초록 참고문헌 中文摘要