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Construction of a protein chip containing MITF (Microphthalmiaassociated transcription factor) and its binding kinetics to target DNA.

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  • 발행기관
    한국생물공학회 바로가기
  • 간행물
    한국생물공학회 학술대회 바로가기
  • 통권
    2007 춘계학술대회 및 국제심포지움 (2007.04)바로가기
  • 페이지
    pp.5-6
  • 저자
    Sang-Hee Yang, Dong Woo Lee, Chi Ho Choi, Hyang-Bok Lee, Hae Jong Kim, Jeong-Hyun Shin, Eun-Ki Kim
  • 언어
    영어(ENG)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A98614

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원문정보

초록

영어
A protein chip was developed for melanogenesis inhibitor screening. MITF (Microphthalmia-associated transcription factor) is a key regulatory transcriptional factor of the pigmentation-related genes such as tyrosinase and MC1R, and binds to specific sequence (CATGTG) in E-box DNA within the promoter of tyrosinase and MC1R in the melanocytes.1), 2) We produced MITF as a MBP (maltose binding protein) fusion protein in E. coli and purified by affinity column and immobilized on β-cyclodextrin coated glass plate. Binding of MITF to its target DNA, E-box oligomer, was monitored by surface plasmon resonance (SPR) and SPR imaging (SPRi).
Unlike SPR and SPRi which employed unlabeled DNA oligomer, we used Cy3-labeled DNA in fluorescent imaging.3) In this method, fluorescent intensity was proportional to the DNA concentration up to 20μM. Among these detection methods, fluorescence method was the most reliable.4) Kinetics of DNA binding with MITF showed Langmuir isotherm and its kinetic
constants were determined. To determine if interaction between MITF and E-box is sequence specific, we modified E-box DNA (CATGTG → CAGCTG) and monitored fluorescent intensity. These results indicated the potentials of MITF-E-box DNA chip as a screening tool for depigmenting agent in the cosmetic industry.

저자

  • Sang-Hee Yang [ Department of Biological Engineering, Inha University ]
  • Dong Woo Lee [ Department of Biological Engineering, Inha University ]
  • Chi Ho Choi [ Department of Biological Engineering, Inha University ]
  • Hyang-Bok Lee [ Department of Biological Engineering, Inha University ]
  • Hae Jong Kim [ Department of Biological Engineering, Inha University ]
  • Jeong-Hyun Shin [ Department of Dermatology, College of Medicine, Inha University ]
  • Eun-Ki Kim [ Department of Biological Engineering, Inha University ]

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
  • 설립연도
    1984
  • 분야
    공학>생물공학
  • 소개
    이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동

간행물

  • 간행물명
    한국생물공학회 학술대회
  • 간기
    반년간
  • 수록기간
    1985~2013
  • 십진분류
    KDC 476 DDC 576

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