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표고버섯의 원형질체 분리 최적화와 RNPs/나노파티클 복합체 형성
Optimization of Protoplast Isolation and Ribonucleoprotein/Nanoparticle Complex Formation in Lentinula edodes

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  • 발행기관
    한국버섯학회 바로가기
  • 간행물
    한국버섯학회지 KCI 등재 바로가기
  • 통권
    제20권 제3호 (2022.09)바로가기
  • 페이지
    pp.178-182
  • 저자
    김민식, 류호진, 오민지, 임지훈, 이종원, 오연이
  • 언어
    한국어(KOR)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A419027

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원문정보

초록

영어
Despite the long history of mushroom use, studies examining the genetic function of mushrooms and the development of new varieties via bio-molecular methods are significantly lacking compared to those examining other organisms. However, owing to recent developments, attempts have been made to use a novel gene-editing technique involving CRISPR/Cas9 technology and genetic scissors in mushroom studies. In particular, research is actively being conducted to utilize ribonucleoprotein particles (RNPs) that can be genetically edited with high efficiency without foreign gene insertion for ease of selection. However, RNPs are too large for Cas9 protein to pass through the cell membrane of the protoplasmic reticulum. Furthermore, guide RNA is unstable and can be easily decomposed, which remarkably affects gene editing efficiency. In this study, nanoparticles were used to mitigate the shortcomings of RNP-based gene editing techniques and to obtain transformants stably. We used Lentinula edodes (shiitake mushroom) Sanjo705-13 monokaryon strain, which has been successfully used in previous genome editing experiments. To identify a suitable osmotic buffer for the isolation of protoplast, 0.6 M and 1.2 M sucrose, mannitol, sorbitol, and KCl were treated, respectively. In addition, with various nanoparticle-forming materials, experiments were conducted to confirm genome editing efficiency via the formation of nanoparticles with calcium phosphate (CaP), which can be bound to Cas9 protein without any additional amino acid modification. RNPs/NP complex was successfully formed and protected nuclease activity with nucleotide sequence specificity.

목차

ABSTRACT
적요
감사의 글
REFERENCES

키워드

Lentinula edodes Protoplast CRISPR/Cas9 Nanoparticles

저자

  • 김민식 [ Minseek Kim | 농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과 ]
  • 류호진 [ Hojin Ryu | 충청북도 청주시 충북대학교 자연대학 ]
  • 오민지 [ Min Ji Oh | 농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과 ]
  • 임지훈 [ Ji-Hoon Im | 농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과 ]
  • 이종원 [ Jong-Won Lee | 농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과 ]
  • 오연이 [ Youn-Lee Oh | 농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과 ] Corresponding author

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국버섯학회 [The Korean Society of Mushroom Science]
  • 설립연도
    1997
  • 분야
    농수해양>농학
  • 소개
    우리나라의 버섯 연구와 관련 산업의 발전에 기여하고 버섯관련 연구자와 관련산업 종사자간의 학술정보 등의 교류를 목적으로 한다.

간행물

  • 간행물명
    한국버섯학회지 [Journal of MUSHROOMS]
  • 간기
    계간
  • pISSN
    1738-0294
  • eISSN
    2288-8853
  • 수록기간
    2003~2025
  • 등재여부
    KCI 등재
  • 십진분류
    KDC 525 DDC 635

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