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Human dipeptidylpeptidase-4(hDPP-4)는 세포표면에 존재하는 당단백질 수용체이며, 다 양한 세포에 발현되어 염증, 세포이동, 세포분화 등에 관련이 있다고 보고되고 있다. DPP-4억제제는 글루카곤 유사 펩타이드-1(glucagon-like-peptide-1, GLP-1)의 분해를 억제 하여 췌장에서 분비되는 인슐린 양을 조절할 수 있게 개발된 의약품으로 제2형 당뇨병에 많이 사용되고 있다. 이러한 DPP-4 억제제에 대한 체내 안전성을 확인하기 위한 모델동 물로 hDPP-4 유전자가 발현되는 형질전환돼지를 개발하였다. 형질전환동물 생산방법으 로 사용한 수정란 미세주입법은 외래유전자가 염색체 내로 임의적으로 삽입되기 때문에, 삽입된 유전자 수와 게놈 내 삽입 위치에 따른 발현량 차이 및 유전자 간섭 현상이 나타 날 수 있다는 보고가 있어, 본 연구에서는 생산된 hDPP-4 형질전환 돼지의 게놈 유전자 를 분리하여 NGS와 genome walking 방법으로 염색체에 삽입된 외래 유전자인 hDPP-4 에 대한 삽입위치를 분석하고자 하였다. NGS 염기서열 분석 결과, 외래유전자(hDPP-4)와 matching되어 삽입되어 있을 것으로 예상되는 염색체 좌위로 2군데가 추정되었고, 이를 바탕으로 PCR을 통한 추가 분석을 진행하였다. 동시에 기존의 genome walking 방법으 로 염색체를 DraI과 EcoRV로 제한효소로 절단하고, 절단면에 합성된 linker를 붙이고, linker에 특이적인 프라이머로 PCR을 진행하여 증폭산물에 대한 염기서열을 분석하였다. 분석결과 Ch. 1 영역 intergenic 영역에 hDPP-4가 삽입되어 있는 것을 확인할 수 있었다. 이 결과를 바탕으로 삽입된 유전자 수에 대한 분석과 세포막에 발현되는 hDPP-4 발현양 상에 대한 분석을 진행하고자 한다.

키워드

저자

• 김지윤 [ 농촌진흥청 국립축산과학원 동물바이오공학과 ]
• 박미령 [ 농촌진흥청 국립축산과학원 동물바이오공학과 ]
• 변승준 [ 농촌진흥청 국립축산과학원 동물바이오공학과 ]
• 오건봉 [ 농촌진흥청 국립축산과학원 동물바이오공학과 ]
• 양현 [ 농촌진흥청 국립축산과학원 동물바이오공학과 ]
• 정학재 [ 농촌진흥청 국립축산과학원 양돈과 ]
• 김경운 [ 농촌진흥청 국립축산과학원 동물바이오공학과 ]

참고문헌

발행기관

간행물

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• 간행물명

  Reproductive & Developmental Biology(Supplement)

• 간기

  연간

• 수록기간

  2001~2017

• 십진분류

  KDC 527 DDC 636