Identification of specific marker proteins in cells is useful for isolating cells and determining their cellular characteristics and functions. Based on our previous study showing that matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) can be used as a marker for porcine spermatogonia, the expression pattern of MMP-9 was determined in both pre- (5-month old) and post-pubertal (11–month old) bovine testes. Histological analysis revealed that spermatogonia were located near the basement membrane in both testes, while spermatozoa were not detected in the 5-month old pre-pubertal bovine testes and epididymides. Mature spermatozoa were observed in the 11-month bovine testes and epididymides, and MMP-9 expression in 11-month old bovine testes was lower than 5-month old testes, according to reverse transcription-PCR and real-time-PCR data. To determine the specific expression sites of MMP-9 in the bovine testes, immunohistochemistry was performed. Expression of MMP-9 was observed in cells near the basement membrane of seminiferous tubules in both 5- and 11-month old testes. Furthermore, MMP-9 positive cells expressed protein gene product 9.5 (PGP9.5) and deleted in azoospermia (DAZL) that are already known as bovine spermatogonial stem cells markers. In the present study, MMP-9 expression was identified in both pre- and post-pubertal bovine spermatogonia expressing PGP9.5 and DAZL, and located near the basement membrane of seminiferous tubules. Thus, MMP-9 can be used as a marker for bovine spermatogonia, and may provide useful platforms for understanding the interaction between germ cells and extracellular matrix during spermatogenesis in the seminiferous tubules.
목차
ABSTRACT Ⅰ. 서론 Ⅱ. 재료 및 방법 1. 정소 조직 준비 2. 유전자 발현 분석 3. 조직 Hematoxylin & Eosin 염색 분석 4. 조직 면역염색 분석 5. 통계 분석 Ⅲ. 결과 1. 소 정소와 정소상체의 조직학적 분석 2. 소 정소에서 mmp-9 유전자 발현 구명 3. 소 정소 내 MMP-9 특이 발현 세포 주 구명 Ⅳ. 고찰 Ⅴ. 요약 사사 Ⅵ. REFERENCES
키워드
BovineSpermatogoniaMMP-9PGP9.5DAZL
저자
곽태일 [ Tae Il Kwak | 건국대학교 줄기세포재생생물학과 ]
이원영 [ Won Young Lee | 건국대학교 식품생명과학부 동물성소재전공 ]
정하연 [ Ha Yeon Jung | 국립축산과학원 낙농과 ]
이승윤 [ Seung Yoon Lee | 한별팜텍 ]
송혁 [ Hyuk Song | 건국대학교 줄기세포재생생물학과 ]
Corresponding author
강원대학교 동물생명과학연구소(구 강원대학교 동물자원공동연구소) [Institute of Animal Life Science Kangwon National University]
설립연도
1999
분야
농수해양>축산학
소개
1970년 3월에 설립된 본 연구소는 국내외 동물자원에 관한 기초 및 응용연구를 통하여 축산업 발전을 선도하고 산학협동 체제를 강화하여 지역사회 발전에 기여함은 물론 통일에 대비한 북한 동물자원에 관한 연구를 체계적으로 수행하기 위함을 근본 목적으로 하고 있다.
본 연구소는 다변화, 과학화된 동물자원 분야에서 이론과 실제를 결부하는 연구활동 뿐만 아니라 학술 및 산학협동 활동 등을 인정받아 1991년에 교육부로부터 법정 연구소로 지정되었으며 1996년에는 이공계 첨단기자재 지원대상 연구소, 한우특성화대학 연구소로 지정되었고 1999년에는 학술진흥재단 대학 부설 중점연구소로 지정되었다. 이러한 지원과 국내외 동물자원 분야의 과학적 정립 및 연구, 발전이라는 고유한 목적 하에서 현재 국제적으로 축산업분야 중 심각한 문제를 가지고 있는 전염성 질병 및 그 대책 마련 등의 연구를 통해 현장애로 및 문제점을 해결하고, 실용적 축산 분뇨처리 방법 개발 및 새로운 축산물 가공품 개발과 유전공학 기법을 이용한 새로운 동물의 작출, 유전적 능력이 우수한 개체의 생산과 육종, 새로운 사료자원의 개발 등의 분야에서 세계적으로 선도적인 연구를 수행하고 있으며 관련분야에서 인정받는 국제적인 연구소로 발전하기 위해 노력을 기울이고 있다.