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연구논문

Thermus thermophilus HJ6 유래 내열성 laccase의 유전자 클로닝 및 효소학적 특성
Gene Cloning and Enzymatic Properties of Thermostable Laccase from Thermus thermophilus HJ6

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  • 발행기관
    한국생물공학회 바로가기
  • 간행물
    KSBB Journal KCI 등재 바로가기
  • 통권
    제27권 제4호 (2012.08)바로가기
  • 페이지
    pp.257-262
  • 저자
    이소영, 정영훈, 서민호, 전숭종
  • 언어
    한국어(KOR)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A183484

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원문정보

초록

영어
The gene encoding Thermus thermophilus HJ6 laccase (Tt-laccase) was cloned, sequenced, and comprised of 1,389 nucleotides encoding a protein (462 amino acids) with a predicted molecular mass of 51,049 Da. The deduced amino acid sequence of Tt-laccase showed 99.7% and 44.3% identities to the Thermus thermophilus HB27 laccase and Synechococcus sp. RS9917 laccase, respectively. Tt-laccase gene was expressed as a fusion protein with six histidine residues in E. coli Rosetta-gami (DE3) cells, and the recombinant protein was purified to homogeneity. UV-Vis spectrum analysis revealed that the enzyme has copper atoms, a type I Cu(II) and a type III binuclear Cu(II). The optimum pH for the oxidation of guaiacol was 5.0 and the optimum temperature was 90℃ The half-life of heat inactivation was about 120 min at 90℃ The enzyme reaction was inhibited by sodium azide, L-cystein, EDTA, dithiothreitol, tropolone, and kojic acid. The enzyme oxidized various known laccase substrates, its lowest Km value being for 4-hydroxyindole, highest kcat value for syringaldazine, and highest kcat/Km for guaiacol.

목차

Abstract
 1. 서론
 2. 재료 및 방법
  2.1. 유전자 클로닝 및 발현 vector 구축
  2.2. 효소 생산 및 정제
  2.3. UV-visible 흡수 스펙트럼 측정
  2.4. 효소활성측정
 3. 결과 및 고찰
  3.1. Tt-laccase 유전자의 클로닝 및 염기서열분석
  3.2. E. coli로부터 재조합 Tt-laccase의 생산
  3.3. Tt-laccase의 UV-visible 흡수 스펙트럼
  3.4. Tt-laccase의 생화학적 특징
  3.5. Tt-laccase의 활성에 대한 금속이온 및 저해제의 효과
 4. 결론
 감사
 References

키워드

Laccase Thermus thermophilus thermostability copper

저자

  • 이소영 [ So-Young Lee | 동의대학교 바이오물질제어학과 ]
  • 정영훈 [ Young-Hoon Jung | 동의대학교 생명공학과 ]
  • 서민호 [ Min-Ho Seo | 동의대학교 생명공학과 ]
  • 전숭종 [ Sung-Jong Jeon | 동의대학교 바이오물질제어학과, 동의대학교 생명공학과 ]

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
  • 설립연도
    1984
  • 분야
    공학>생물공학
  • 소개
    이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동

간행물

  • 간행물명
    KSBB Journal
  • 간기
    격월간
  • pISSN
    1225-7117
  • 수록기간
    2009~2013
  • 십진분류
    KDC 476 DDC 576

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