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특집 : 식품효소 - 연구논문
Saccharomyces cerevisiae 에서 Aspergillus oryzae 유래의 exo-β-1,3-glucanase (laminarinase)의 생산 최적화
Optimization for Production of Exo-β-1,3-glucanase (Laminarinase) from Aspergillus oryzae in Saccharomyces cerevisiae
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- 발행기관
- 한국생물공학회 바로가기
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- 간행물
- KSBB Journal KCI 등재 바로가기
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- 통권
- 제26권 제5호 (2011.10)바로가기
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- 페이지
- pp.427-432
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- 저자
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- 언어
- 한국어(KOR)
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- URL
- https://www.earticle.net/Article/A159531
※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.
원문정보
초록
- 영어
- In this study, a EXGA gene code for exo-β-1,3- glucanase from Aspergillus oryzae was overexpressed and secretory produced in Saccharomyces cerevisiae. To overexpress the β-1,3-glucanase, pGInu-exgA and pAInu-exgA plasmids having GAL10 and ADH1 promoter, respectively, and exoinulinase signal sequence (Inu s.s) were constructed and introduced in S. cerevisiae SEY2102 and 2805. The recombinant β-1,3- glucanase was successfully expressed and secreted into the medium and the β-1,3-glucanase activity in 2102/pGInu-exgA and 2102/pAInu-exgA strain were 5.01 unit/mL and 4.09 unit/mL, respectively. In the 2805/pGInu-exgA and 2805/pAInu-exgA strain, the β-1,3-glucanase activity showed 3.23 unit/mL and 3.22 unit/mL, respectively. Secretory efficiency in each strain reached 95% to 98%. Subsequently, the recombinant β-1,3-glucanase was used for ethanol production. Ethanol productivity in 2102/pAInu-exgA strain was 0.83 g/L when pre-treated Laminaria japonica which has initial reducing sugar of 1.4 g/L was used as substrate. It is assumed that the polysaccharides of Laminaria japonica was effectively saccharified by recombinant β-1,3-glucanase, resulting in increase of ethanol productivity. These results suggested that recombinant β-1,3- glucanase was efficiently overexpressed and secreted in S. cerevisiae SEY2102 as host strain by using ADH1 promoter-Inu s.s system.
목차
Abstract
1. 서론
2. 재료 및 방법
2.1. 사용균주 및 plasmids
2.2. 재조합 plasmid 구축 및 형질전환
2.3. 배지 조성 및 배양조건
2.4. 균체 농도 및 Plasmid 안정성
2.5. MUG plate assay
2.6. 균체분획 및 β-1,3-glucanase 활성 측정과 분비효율
2.7. SDS-PAGE에 의한 단백질 확인
2.8. 에탄올 생산성 측정
3. 결과 및 고찰
3.1. β-1,3-glucanase 발현 재조합 plasmid의 구축
3.2. 효모 형질전환체 선별 및 MUG assay
3.3. β-1,3-glucanase 과발현 및 분비생산
3.4. β-1,3-glucanase 단백질 확인 및 에탄올 생산성
4. 결론
감사
References
키워드
3-glucanase ADH1 promoter GAL10 promoter Aspergillus oryzae Saccharomyces cerevisiae β-1저자
간행물 정보
발행기관
-
- 발행기관명
- 한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
- 설립연도
- 1984
- 분야
- 공학>생물공학
- 소개
- 이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동
간행물
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- 간행물명
- KSBB Journal
- 간기
- 격월간
- pISSN
- 1225-7117
- 수록기간
- 2009~2013
- 십진분류
- KDC 476 DDC 576
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