Earticle

현재 위치 Home

Activin-A 처리에 의해 분화 촉진된 인간 배아 줄기세포 유래 내배엽성 세포의 효과적인 정제
Effective Isolation of Endodermal Lineage Cells Derived from Human embryonic Stem Cells Post Activin-A Treatment

첫 페이지 보기
  • 발행기관
    한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) 바로가기
  • 간행물
    Reproductive & developmental biology 바로가기
  • 통권
    Volume 34 No 3 (2010.09)바로가기
  • 페이지
    pp.135-141
  • 저자
    김문규, 문성환, 박순경, 이경일, 신정민, 장재우, 정형민
  • 언어
    한국어(KOR)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A128404

※ 기관로그인 시 무료 이용이 가능합니다.

4,000원

원문정보

초록

영어
Embryoid bodies (EBs) generated from human embryonic stem cells (hESCs) include spontaneously induced endodermal lineage cells (ELCs). Activin-A plays important roles in the endoderm differentiation of hESCs. Despite studies on the generation of ELCs from hESCs with treatment of Actvin-A, it was unclear for localization and pattern of ELCs by Activin-A during differentiation of hESCs. Accordingly in this study, we knew that Actvin-A increased the cystic EBs formation, including the highly enriched AFP (endoderm lineage specific marker)-expressing cells in the surface of cystic EBs. To induce the EBs formation from undifferentiated hESCs, cells were transferred onto petri-dish and cultured in suspension condition without bFGF removed hESC media (EB media) for 3 days. Next to investigate the effect of Activin-A, EBs were subsequently cultured in EB media supplement with 100 ng/ml Activin-A for 3 days. After 5～7 days of Activin-A treatment, cystic EBs began to appear which increased in numbers reaching ～60% of initially formed EBs over 5 days. Endoderm lineage marker, AFP were highly expressed and specifically localized at the surface region of cystic EBs comparison with normal EBs. We next attached the cystic EBs onto gelatin-coated plates and cultured for 5 days. In the results of real-time PCR and immunocytochemistry analysis, AFP-expressing cells migrated and localized at the outgrowth region of attached cystic EBs. To obtain the AFP-expressing cells of the outgrowth region, we manually isolated by using micro- dissection and cultured them. These cells strongly express AFP over 70% of isolated cells post re-plating. Here, we first showed an expression pattern of specifically localized ELCs by Activin-A during differentiation of hESCs. From this observation, we could highly purified ELCs from undifferentiated hESCs. Taken together, our system will provide a novel and efficient option to generate ELCs from hESCs.

목차

ABSTRACT
 서론
 재료 및 방법
  배상체 형성 및 내배엽성 세포로의 분화
  내배엽성 세포의 정제 및 배양
  RNA 추출 및 실시간 중합효소 연쇄 반응 분석
  면역 염색 분석
  통계처리 및 분석
 결과
  Actvin-A가 배상체 형성에 미치는 형태학적 분석
  Activin-A에 의한 배상체 내에서의 내배엽성 세포의 발현 패턴 및 분포도 분석
  부착된 배상체에서의 AFP발현 패턴을 이용한 고순도 내배엽성 세포의 정제
 고찰
 인용문헌

키워드

Human embryonic stem cells EB formation Endoderm differentiation Activin-A Micro-dissection

저자

  • 김문규 [ Mun-Kyu Kim | 치외과대학 의생명과학대학원 줄기세포 연구실 ]
  • 문성환 [ Sung-Hwan Moon | 차바이오앤디오스텍 ]
  • 박순경 [ Toon-Jung Park | 치외과대학 의생명과학대학원 줄기세포 연구실 ]
  • 이경일 [ Kyung-Il Lee | 차바이오앤디오스텍 ]
  • 신정민 [ Jeong-Min Shin | 차바이오앤디오스텍 ]
  • 장재우 [ Jae-Woo Jang | 치외과대학 의생명과학대학원 줄기세포 연구실 ]
  • 정형민 [ Hyung-Min Chung | 치외과대학 의생명과학대학원 줄기세포 연구실, 차바이오앤디오스텍 ] Corresponding author

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) [The Korean Society of Animal Reproduction and Biotechnology]
  • 설립연도
    1976
  • 분야
    농수해양>축산학
  • 소개
    동물번식생리학, 동물생명공학, 수의학, 인공수정 및 수정란이식을 이용한 동물개량에 관한 이론과 기술의 발전을 통해 학계, 연구계, 산업계 및 양축가 상호간의 협력을 도모함으로써 동물과학발전 및 사회일반의 이익에 기여 한다는 목적을 위해 노력해 나가겠습니다.

간행물

  • 간행물명
    Reproductive & developmental biology
  • 간기
    계간
  • pISSN
    1738-2432
  • eISSN
    2288-0151
  • 수록기간
    1977~2018
  • 십진분류
    KDC 527 DDC 636

이 권호 내 다른 논문 / Reproductive & developmental biology Volume 34 No 3

    피인용수 : 0건 (자료제공 : 네이버학술정보)

    함께 이용한 논문 이 논문을 다운로드한 분들이 이용한 다른 논문입니다.

      출처 : 네이버학술정보

        0개의 논문이 장바구니에 담겼습니다.

        페이지 저장
        소속기관 조회
        이용자님의 소속기관(단체)이 서비스에 가입되어 있는지 확인해 보십시오.
        기관회원에 소속되어 있는 이용자는 원문을 무료로 이용할 수 있습니다.