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42번째 alanine 잔기의 proline 치환에 의한 보리 α-amylase isozyme 2의 대장균 내 발현 증가 및 기질특이성 변화
Enhanced Expression and Substrate Specificity Changes of Barley α-Amylase Isozyme 2 in E. coli by Substitution of the 42nd Alanine Residue with Proline

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  • 발행기관
    한국식품과학회 바로가기
  • 간행물
    한국식품과학회지 SCOPUS KCI 등재 바로가기
  • 통권
    제42권 제2호 (2010.04)바로가기
  • 페이지
    pp.198-203
  • 저자
    최승호, 장명운, 이홍균, Birte Svensson, 김태집
  • 언어
    한국어(KOR)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A118604

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원문정보

초록

영어
Although barley α-amylase isozyme 1 (AMY1) and 2 (AMY2) share up to 80% of amino acid sequence identity, their enzymatic properties differ remarkably. In this study, the 42nd alanine residue of AMY2 was replaced with another random amino acid via saturation mutagenesis. Eight out of 370 recombinant E. coli cells showing enhanced starch-hydrolyzing activity were characterized as possessing the same proline residue instead of alanine. Even though the specific activity of AMY2-A42P is reduced to 81% of wild-type, its expression level and purification yield were enhanced by approximately 2 and 4 times that of AMY2, respectively. Characterization of its enzymatic properties confirmed that AMY2-A42P is similar to that of wild-type. However, its specificity to starch substrates is likely to be intermediate between AMY1 and AMY2.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  실험재료 및 시약
  보리 α-amylase 돌연변이 제조 및 선발
  보리 α-amylase의 발현 및 정제
  DNS 환원당 정량을 통한 효소활성 측정
  Insoluble blue starch(IBS) 분해활성 측정
  효소반응산물 분석
 결과 및 고찰
  Saturation mutagenesis를 이용한 돌연변이 제조
  전분 분해활성이 증가된 AMY2 돌연변이 선발
  AMY2-A42P 효소의 대장균 내 발현 및 정제
  AMY2-A42P 효소의 기질 특이성 및 가수분해 특성
  AMY2-A42P의 calcium 의존성 및 pH 안정성
 요약
 문헌

키워드

barley α-amylase 2 saturation mutagenesis enhanced expression substrate specificity Escherichia coli

저자

  • 최승호 [ Seung-Ho Choi | 충북대학교 식품공학과 ]
  • 장명운 [ Myoung-Uoon Jang | 충북대학교 식품공학과 ]
  • 이홍균 [ Hong-Gyun Lee | 충북대학교 식품공학과 ]
  • Birte Svensson [ Department of Systems Biology, Technical University of Denmark ]
  • 김태집 [ Tae-Jip Kim | 충북대학교 식품공학과 ] Corresponding author

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국식품과학회 [Korean Society of Food Science and Technology]
  • 설립연도
    1970
  • 분야
    농수해양>식품과학
  • 소개
    본회는 사회일반의이익에 공여하기 위하여 공공법인의 운영에 관한 법률의 규정에 따라 식품 과학 전반에 관한 이론 및 기술연구와 그 응용을 촉진 및 보급시키며 학술과 사업을 연계시키고, 나아가 국민의 식생활을 질적, 양적으로 향상시킴을 목적으로 한다.

간행물

  • 간행물명
    한국식품과학회지 [Korean Journal of Food Science and Technology]
  • 간기
    격월간
  • pISSN
    0367-6293
  • 수록기간
    1969~2011
  • 십진분류
    KDC 574 DDC 664

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