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효소공학
Rapid Screening Method for the Detection of Hydroxylated Daidzein by Matrix-assisted Laser Desorption/ Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry (MALDITOF-MS)
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- 발행기관
- 한국생물공학회 바로가기
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- 간행물
- 한국생물공학회 학술대회 바로가기
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- 통권
- 2009 추계학술대회 및 국제심포지움 (2009.11)바로가기
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- 페이지
- pp.171-171
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- 저자
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- 언어
- 영어(ENG)
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- URL
- https://www.earticle.net/Article/A115066
※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.
원문정보
초록
- 영어
- There is continuing interest in self-sufficient P450 engineering for the biotransformation of aromatic compounds like flavonoid, chalcone and lignin monomers with the object of increasing antioxidant effect. However there is no efficient screening system to analyze large number of mutant library against that substrate. In this study, we developed the high throughput screening system using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry
(MALDI-TOF-MS) to screen the P450 BM3 mutant library towards daidzein. The hydroxylation activity of the P450 BM3 F87A mutants saturated at Y51 has been shown to occur to varying degrees with small alterations in the structure of substrates. Reaction and extraction of mutant library were carried out in 96 deep-well plates. Reaction sample containing more than one substrate were spotted on the 384 MALDI target plate with a matrix and surfactant. To reduce
matrix ion interference, small molecule analytes have been investigated with respect to their suitability for use in analysis by surfactant applied MALDI-TOFMS. Hydroxylated metabolites were automatically detected within 2 hours. In this way developed method for the detection of the hydroxyated flavonoid and lignin monomers can be applied to screen the large number of mutant library against the different substrates at a same time, which is less time consuming and more accurate than the conventional screening methods.
키워드
P450 BM3 MALDI-TOF MS daidzein저자
간행물 정보
발행기관
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- 발행기관명
- 한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
- 설립연도
- 1984
- 분야
- 공학>생물공학
- 소개
- 이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동
간행물
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- 간행물명
- 한국생물공학회 학술대회
- 간기
- 반년간
- 수록기간
- 1985~2013
- 십진분류
- KDC 476 DDC 576
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