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학생구두발표 (영어발표): 좌장: 전태준 교수(인하대학교)
Importance of Expression System in the Production of Unnatural Recombinant Proteins in Escherichia coli
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- 발행기관
- 한국생물공학회 바로가기
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- 간행물
- 한국생물공학회 학술대회 바로가기
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- 통권
- 2009 추계학술대회 및 국제심포지움 (2009.11)바로가기
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- 페이지
- pp.133-133
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- 저자
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- 언어
- 영어(ENG)
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- URL
- https://www.earticle.net/Article/A114523
※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.
원문정보
초록
- 영어
- In this study, we investigated the efficiencies by which the pET and pQE expression systems produce unnatural recombinant proteins by selective pressure incorporation of unnatural amino acids, a method through which it was found that type of gene expression system tremendously influences the production yield of unnatural proteins in Escherichia coli. Green fluorescent protein (GFP) and a single-chain Fv antibody against c-Met (anti-c-Met sc-Fv) were utilized as model recombinant proteins while Lhomopropargylglycine (Hpg), a methionine analogue that incorporates into the methionine residues of a recombinant protein, was used as model unnatural amino acid. The pET system produced an almost negligible amount of Hpg-incorporated unnatural protein compared to the amount of methionine-incorporated natural protein. However, comparable amounts of unnatural and natural protein were produced by the pQE expression system. The amount of unnatural GFP protein produced through pET
expression was not increased despite the over-expression of methionyl tRNA synthetase,
which can enhance the activation rate of methionyl-tRNA with a methionine analogue. Incorporation of Hpg decreased the productivity of active GFP by approximately 2.5 fold, possibly caused by the inefficient folding of Hpg-incorporated GFP. Conversely, the productivity of functional anti-c-Met sc-Fv was not influenced by incorporation of Hpg. We confirmed through LC-MS and LCMS/MS that Hpg was incorporated into the methionine residues of the recombinant proteins produced by the pQE expression system. In this way, this study could show the importance of expression system upon unnatural amino acids incorporation for the production of tailor-made synthetic proteins.
키워드
unnatural amino acids L-homopropargylglycine (Hpg) Green fluorescent protein (GFP)저자
간행물 정보
발행기관
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- 발행기관명
- 한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
- 설립연도
- 1984
- 분야
- 공학>생물공학
- 소개
- 이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동
간행물
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- 간행물명
- 한국생물공학회 학술대회
- 간기
- 반년간
- 수록기간
- 1985~2013
- 십진분류
- KDC 476 DDC 576
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