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외래 유전자의 호율적인 발현 조절을 위한 개선된 Tetracycline-Inducible Expression System의 구축
Construction of Improved Tetracycline-Inducible Expression System for the Effective Regulation of Transgene Expression

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  • 발행기관
    한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) 바로가기
  • 간행물
    Reproductive & developmental biology 바로가기
  • 통권
    Volume 33 No 1 (2009.03)바로가기
  • 페이지
    pp.63-69
  • 저자
    구본철, 권모선, 김태완
  • 언어
    한국어(KOR)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A106307

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원문정보

초록

영어
In this study we tried to construct a more efficient tetracycline-inducible gene expression system by replacing previous key elements with more advance ones. At the beginning, we substituted PGK (phophoglycerate kinase) promoter for CMV (cytomegalovirus) promoter to control “rtTA2sM2” which has been known for high induction efficiency in response to tetracycline. With this modification, expression of the EGFP marker gene under the induction condition was significantly increased. Next, we replaced “TRE” fragment with a modified version named “TRE- tight” which has been reported to have higher affinity and specificity to the transactivator by minor base change of the “TRE” DNA fragment sequence. Use of “TRE-tight” instead of “TRE” resulted in more than 10 fold increment in terms of induction efficiency and significant decrement of background expression in non-inducible condition. By combining PGK promoter and “TRE-tight” fragment, we could upgrade previous tetracycline-inducible system to show more stringent turn on/off gene switch ability and stronger expression of the gene of our interest. Use of this newly developed system must be very helpful to the studies of gene expression, especially to the transgenic animal study in which non-controllable constitutive expression of the transgene has been one of the urgent problems to be solved.

목차

ABSTRACT
 서론
 실험방법
  Tet System의 개선
  Tet System에 의한 EGFP 유전자 발현 조절 양상의 분자생물학적 분석
  형광현미경을 이용한 EGFP 발현 관찰
  RT-PCR
  Fluorometry와 Western Blotting
 결과
  형광현미경 하에서의 각 Vector에 따른 EGFP 발현 조절 양상 관찰
  각 세포주에서 EGFP 발현 조절 양상에 대한 RT-PCR 분석
  각 세포주에서 EGFP 발현에 대한 단백질 수준의 정량 분석
 고찰
 인용문헌

키워드

rtTA2SM2 PGK promoter TRE-tight EGFP Induction efficiency

저자

  • 구본철 [ Bon Chul Koo | 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실 ]
  • 권모선 [ Mo Sun Kwon | 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실 ]
  • 김태완 [ Teoan Kim | 대구가톨릭대학교 의과대학 생리학교실 ] Corresponding author

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국동물생명공학회(구 한국동물번식학회) [The Korean Society of Animal Reproduction and Biotechnology]
  • 설립연도
    1976
  • 분야
    농수해양>축산학
  • 소개
    동물번식생리학, 동물생명공학, 수의학, 인공수정 및 수정란이식을 이용한 동물개량에 관한 이론과 기술의 발전을 통해 학계, 연구계, 산업계 및 양축가 상호간의 협력을 도모함으로써 동물과학발전 및 사회일반의 이익에 기여 한다는 목적을 위해 노력해 나가겠습니다.

간행물

  • 간행물명
    Reproductive & developmental biology
  • 간기
    계간
  • pISSN
    1738-2432
  • eISSN
    2288-0151
  • 수록기간
    1977~2018
  • 십진분류
    KDC 527 DDC 636

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