To verify enchancing effect of polycation of polycation on the retroviral infecivity, we directly measured the binding affinity of retroviruses to the target cells in the presence or in the absence of polybrene with R18 fluorescence assay and examined the effect of the polymers on the relationship between the host cell and the retroviral infecity. There was no difference in the effect of the types of charge of the polymer on the binding affinity. However, polycations, in general, show effect on the retrovirus infecity. This results suggest that the enhancing effect of polybrene and other polycations on the infecity is not due to the binding step but due to the post-binding steps, especially the internalization step. With the result of the internalization of FITC-labeled poly-L-lysine into the host cells, it is suggested that the uptake of polycations into the host cells would play a crucial role in the intermalization of retroviruses.
한국어
유전자 전달 수단으로 사용되는 레트로바이러스의 감염 효율을 증대시키는 고분자양이온의 역할을 알아보기 위해 R18 형광 물질을 이용해 고분자 양이온 중 하나인 polybrene의 유무에 따른 레트로바이러스와 세포간의 binding affinity를 직접적으로 측정하였으며 그 외의 여러 고분자물질의 레트로바이러스의 감염에 어떠한 영향을 미치는지 알아보았다. 그 결과 고분자의 전하는 레트로바이러스와 세포간의 binding affinity에는 영향을 미치지 않았으나 감염효율을 증대시키는 것은 고분자양이온 뿐이었다. 이는 고분자양이온이 레트로바이러스의 감염시 binding과정이 아닌 그 이후의 과정, 특히 internalization 과정에 영향을 미치는 것으를 나타난다. FITC가 부착된 poly-L-lysine이 세포안으로 들어가는 사실을 통해 고분자양이온의 세포안으로의 유입이 바이러스의 internalization과정에 중대한 영향을 미치는 것을 알 수 있었다. 또한 분자량이 다른 poly-L-lysine을 이용해 고분자양이온의 경우 그 분자량에 따라 최적농도가 다름을 알 수 있었다
목차
서론 재료 및 방법 시약 세포배양 및 배양조건 레트로바이러스의 생산과 정량 X-gal staining 분석 R18 형광 분석 PoIy-L-Iysine 의 세포내 유입 결과 레트로바이러스의 binding과 internalization에 미치는 polybrene의 영향 R18 형광 분석을 이용한 binding affinity 측정 고분자들의 감염성과 binding affinity에 대한 영향 PoIy-L-Iysine의 셰포내 유입 고분자양이온의 분자량(molecular weight) 또는 분자의 크기(molecular size)에 따른 감염효율의 변화 고찰 요약 참고문헌
키워드
Retroviruspolycationbinding affinityinfectivity
저자
강승현 [ Seung-Hyun Kang | 서울대학교 유전공학연구소 및 공과대학 응용화학부 ]
김승철 [ Seung-Chul Kim | 서울대학교 유전공학연구소 및 공과대학 응용화학부 ]
이선구 [ Sun-Gu Lee | 서울대학교 유전공학연구소 및 공과대학 응용화학부 ]
김병기 [ Byung-Gee Kim | 서울대학교 유전공학연구소 및 공과대학 응용화학부 ]
Corresponding Author
한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
설립연도
1984
분야
공학>생물공학
소개
이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다
1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력
2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동
3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최
4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간
5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의
6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동