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초록

영어

In order to improve the transfection efficiency of CHO/dhfr- cells using cationic lipid, optimal concentrations of the cationic lipid(LipofectAmineTM) and DNA(pEGFP-C1) need to be determined. The use of green fluorescent protein(GFP) gene as a reporter gene facilitated the quantification of transfection efficiency. The green fluorescence intensity of each cell transfected at various lipid-DNA concentrations was measured using fluorescence-activated cell sorter(FACS) analysis. A combination of 2.0uL cationic lipid and 0.4$ug$ DNA in a well resulted in the highest trasfection efficiency. Taken together, the method using FACS analysis of GFP is simple and fast, facilitating the optimization of transfection.

한국어

CHO/dhfr- 세포에 대해 LipofectAmineTM을 이용한 유전자 이입 효율을 증가시키기 위하여 지질과 DNA의 최적 농도를 구하였다. Reporter 유전자로서 GFP 유전자를 이용하였으며, 여러 농도의 지질 DNA로 유전자 이입된 각 세포군에서 나타나는 green fluorescence intensity를 FACS 분석함으로써 유전자 이입 효율을 정량화 할 수 있었다. 그 결과 24-well plate에서 2.0uL LipofectAmineTM과 0.4ug DNA를 조합하여 사용했을 때 최적의 유전자 이입 효율이 나타남을 알 수 있었다. 또한, GFP는 유전자 이입 최적화를 수행하는 데에 여러가지 면에서 유용한 수단이 될 수 있음을 확인할 수 있었다.

목차

서론
 재료 및 방법
  세포주 및 배양 방법
  Vector
  CHO/dhit-세포의 유전자 이입 최적화
  FACS 분석을 위한 세포의 전처리
  FACS 분석
 결과 및 고찰
 요약
 감사
 참고문헌

키워드

저자

• 김태경 [ Tae-Kyung Kim | 한국과학기술원 생물과학과 ]
• 박민태 [ MIn Tae Park | 한국과학기술원 생물과학과 ]
• 이균민 [ Gyun Min Lee | 한국과학기술원 생물과학과 ] Corresponding Author

참고문헌

발행기관

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• 간행물명

  KSBB Journal

• 간기

  격월간

• pISSN

  1225-7117

• 수록기간

  2009~2013

• 십진분류

  KDC 476 DDC 576