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개량된 방법에 의한 사람혈소판으로부터 TGF-B 1의 분리
Purification of TGF-B 1 from Human Platelets by an Improved Method
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- 발행기관
- 한국생물공학회 바로가기
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- 간행물
- KSBB Journal KCI 등재후보 바로가기
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- 통권
- 제14권 제1호 (1999.02)바로가기
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- 페이지
- pp.9-16
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- 저자
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- 언어
- 한국어(KOR)
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- URL
- https://www.earticle.net/Article/A102772
※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.
원문정보
초록
- 영어
- Transforming growth factor B1(TGF-B1) has potentials to be used as a new therapeutic agent. However, studies with TGF-B were hindered by its high cost. In this study, we developed an improved method to purify TGF-B1 from human platelets, for which four purification steps were used: platelet extraction, gel filtration, cation exchange chromatography, and reverse phase high performance liquid chromatography. After a final step of purification, a pure protein with a molecular weight of 25,000 corresponding to the commercially available TGF-B1 was obtained, which were confirmed by silver staining and Western blotting after SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). It was confirmed by the inhibitory effects of TGF-B1 on a mink lung epithelial cell line that the purified TGF-B1 had its biological activity, whose activity is slightly higher than that of the commercially available TGF-B1. About 3.7$[\mug?]purified TGF-B1was obtained from 10 units of concentrated human platelets, the final yield of which is about 21%.
- 한국어
- Transforming growth factor B1(TGF-B)은 여러 가지 생물학적 활성을 가지는 관계로 의학적 치료제로서 사용될 가능성이 크다. 본 연구에서는 혈소판추출, 젤여과, 양이온교환 크로마토그래피 및 역상 HPLC등 네 단계의 정제과정으로 이루어져 있는 정제공정을 이용한 TGF-B1을 값싸고 효울적으로 정제하였다. 이 과정을 거쳐 최종적으로 얻어진 TGF-B1은 비환원조건하에서 SDS-PAGE를 행한 결과 구매된 TGF-B1 표준품과 일치한 위치에서 한 개의 band가 관찰되어 순수하다는 것을 확인하였으며 또한 이것이 Westem blot를 통하여 TGF-B1 항체와 결합하는 것으로부터 TGF-B1임을 확인하였다 또한, mink lung epithelial cell line 을 이용한 성장저해 실험을 통해 정제된 TGF-B1이 구매되TGF-B1 표준품보다 조금 높은 활성을 가지는 것을 확인하였다 최종적으로 농축혈소판 10단위로부터 약 3.7g의 정제된 TGF-B1이 얻어져 그 최종수율은 약 21%였다.
목차
서론
재료 및 방법
재료 및 장비
협소판의 추출
젤여괴 크로마토그래피
양이온교환 크로마토그래피
역상 HPLC 크로마토그래피
TGF-B1의 생물학적 활성측정
TGF-B1의 순도 측정
TGF-B1의 Western blot assay
Sandwich ELISA를 이용한 TGF-B1의 정량
결과
혈소판으로부터 단백질의 추출
젤여과 크로마토그래피를 이용한 TGF-B1의 정체
양이온교환 크로마토그래피를 이용한 TFG-B1의 정제
역상 HPLC를 이용한 TGF-B1의 정제
각 정제단계에서의 분리능 및 수율
각 정제단계에서의 TGF-B1의 항원성 및 안정성
정제된 TGF-B1의 생물학적 활성측정
고찰
요약
참고문헌
키워드
transforming growth factor B1 chromatography purification human platelet저자
간행물 정보
발행기관
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- 발행기관명
- 한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
- 설립연도
- 1984
- 분야
- 공학>생물공학
- 소개
- 이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동
간행물
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- 간행물명
- KSBB Journal
- 간기
- 격월간
- pISSN
- 1225-7117
- 수록기간
- 2009~2013
- 십진분류
- KDC 476 DDC 576
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