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액상 효소반응을 이용한 Membrane Strip 형 Cholesterol 측정시스템의 개발
Development of Membrane Strip Assay System for Lipoprotein Cholesterol Based on Liquid-Phase Enzyme Reactions

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  • 발행기관
    한국생물공학회 바로가기
  • 간행물
    KSBB Journal 바로가기
  • 통권
    제13권 제5호 (1998.10)바로가기
  • 페이지
    pp.577-584
  • 저자
    신인수, 목락선, 장미라, 백세환
  • 언어
    한국어(KOR)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A102747

※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.

원문정보

초록

영어
A sensitive membrane strip assay for plasma lipoprotein cholesterol that can be performed without handling reagents has been investigated. We previously developed an assay system with immobilized enzymes (cholesterol esterase and cholesterol oxidase) on the surfaces of nitrocellulose membrane(1). In such a case, the amount of enzymes present on the membrane was limited by its surface area and, thus, the detection capability was relatively poor (> 50 mg/dL cholesterol). To overcome this problem, we devised a new system with non-immobilized enzymes by placing them within interstitial spaces of a celullose membrane pad in a dry state. Upon contact with sample medium, the enzymes were immediately dissolved and participated in the reactions with cholesterol in a liquid phase. We constructed a user-friendly system consisting of four membrane pads fro sample application, cholesterol decomposition, color development as signal, and medium absorption to invoke a continuous flow (sequential location from the bottom). A sample containing lipoproteins was added into the application pad by capillary action and transferred to the next pad for decomposition. The decomposition pad (namely, enzyme pad) contained a detergent (sodium cholate) for the destruction of lipoprotein particles, the two enzymes for cholesterol decomposition, and a chromogen (3,3'-diaminobenzidine). As a consequence of the enzyme reactions, hydrogen peroxide was produced, and then reacted in the presence of the chromogen with horseradish peroxidase immobilized on the signal generation pad. Finally, a colorimetric signal directly proportional to the cholesterol concentration was produced. The detection limit determined from this system under optimal conditions was at least 2 times lower than of the enzyme-immobilized system.

목차

서론
 재료 및 방법 
  재료
  Cholestero 분해 효소패드의 제조
  HRP가 고정화된 신호발생패드의 제조
  측정시스템 구성과 분석과정
  효소패드 내 반응물 농도 최적화
  시료첨가방법 및 운반조건 결정
  농도응답곡선
 결과 및 고찰
  변수 최적화
  효소패드에 포함된 반응물 농도
  운반용액의 pH.
  시료 첨가방법 및 첨가패드 세공크기
  측정성능 시험
  농도응답
  측정민감도 비교
 요약
 감사의 글
 참고문헌

키워드

membrane strip assay lipoprotein cholesterolm non-immobilized enzyme detection limit

저자

  • 신인수 [ In-Soo Shin | 식품의약품 안정청 ]
  • 목락선 [ Rak-Sun Mok | 고려대학교 생명공학원 ]
  • 장미라 [ Mi-Ra Jang | 고려대학교 생명공학원 ]
  • 백세환 [ Se-Hwan Park | 고려대학교 생명공학원 ] Corresponding Author

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
  • 설립연도
    1984
  • 분야
    공학>생물공학
  • 소개
    이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동

간행물

  • 간행물명
    KSBB Journal
  • 간기
    격월간
  • pISSN
    1225-7117
  • 수록기간
    2009~2013
  • 십진분류
    KDC 476 DDC 576

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