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창난젓에서 분리한 Rhodococcus sp. 3T6-5Mj가 생산하는 Cholesterol Oxidase의 정제 및 특성
Pruification and Characterization of Cholesterol Oxidase Produced by Rhodococcus sp. 3T6-5Mj isolated from Changran-jeot
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- 발행기관
- 한국생물공학회 바로가기
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- 간행물
- KSBB Journal 바로가기
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- 통권
- 제13권 제2호 (1998.04)바로가기
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- 페이지
- pp.195-202
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- 저자
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- 언어
- 한국어(KOR)
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- URL
- https://www.earticle.net/Article/A102688
※ 원문제공기관과의 협약기간이 종료되어 열람이 제한될 수 있습니다.
원문정보
초록
- 영어
- The cholesterol oxidase was purified from the culture broth of Rhodococcus sp. 3T6-5Mj strain by procedures involving filtration, acetone precipitation, DEAE-Sephadex A-50, and cholesterol affinity column chromatography with a recovery of 15% to specific activity of 25.6 units/mg. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 52,000 daltons by SDS-PAGE. Optimum pH and temperature for the enzyme activity were approximately pH 7.0 and 50℃ respectively. The Michaelis constant (Km) for cholesterol was found to be 3.2x10-4M. The enzyme showed a high substrate specificity for 3B-hydroxysterols and the relative oxidation rates were 100% for cholesterol, 89% for campesterol, 55% for stigmasterol, etc. Amino acid analysis showed that the enzyme protein was composed of 440 amino acid residues without cystein and tryptophan.
- 한국어
- Rhodococcus sp. 3T6-5Mj 균주의 배양액으로부터 0.2um membrane filter을 통과시키고, 아세톤 침전, DEAE-Sephadex A-50 column chromatography의 약음이온 교환수지,cholesterol affinity column chromatography를 통과시켜서 콜레스테롤 산화 효소를 25.6units/mg의 비활성도, 15%의 회수율,88배로 정제할 수 있었다. 본 균주가 생산하는 콜레스테롤산화효소의 분자량은 SDS-PAGE로 측정한 결과 약,52,000 daltons 정도로 추정되었다. 그리고 이 효소의 Km값은 콜레스테롤을 기질로 측정하였을 때3.2x10-4M 이었다. 본 효소의 최적온도는 50℃ 최적 pH는 7.0으로 나타났으며, 열에 대한 안정성은 30~45℃,pH에 대한 안정성은 6.5~11.0으로 나타났다. 본 효소는 cholesterol, campesterol, stigmasterol, hecogenin, Bm-sistosterol의 기질에 특이성을 나타내었다. 본 효소의 아미노산 440개의 잔기로 이루어져 있으며,그 아미노산 조성은 aspararine/aspartate > glutamine/glutamate > proline > alaline > histidine 의 순으로 나타났다. 본 효소는 효소적 혈중 콜레스테롤의 측정방법에 필수적인 콜레스테롤 산화 효소의 이용 가능성을 보여 주었다.용 가능성을 보여 주었다.
목차
서론
재료 및 방법
사용균주 및 시약
조효소액의 조제
콜레스테롤 산화효소의 활성측정
효소의 분리 및 정제
전기영동
단백질 정량
효소의 물리화학적 성질의 측정
결과 및 고찰
콜레스테롤 산화효소의 분리 및 정제
효소단백질의 순도검정
효소의 물리화학적 성질
요약
참고문헌
키워드
cholesterol oxidase purification characterization.저자
간행물 정보
발행기관
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- 발행기관명
- 한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
- 설립연도
- 1984
- 분야
- 공학>생물공학
- 소개
- 이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동
간행물
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- 간행물명
- KSBB Journal
- 간기
- 격월간
- pISSN
- 1225-7117
- 수록기간
- 2009~2013
- 십진분류
- KDC 476 DDC 576
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