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초록

영어

This paper described the extraction/purification of β-carotene from recombinant E.coli and evaluation of anti-wrinkle activity of purified β-carotene. No significant differences in extraction yields were observed when hexane or isobutyl acetate was used.
However, extraction from wet-cell cake resulted in 2-fold higher amount of β-carotene than that from dry cells. Disruption of 5 g-wet cells by ultrasonic homogenizer, acetone dehydration, extraction with isobutyl acetate resulted in 36 mg of β-carotene corresponding to 61.2% of recovery. The formation and separation of β-carotene crystal improved the purity. 633 mg of β
-carotene crystal with 93% purity was obtained from 223 g/L of wet-cell cake harvested from 2.5-L fed-batch culture broth.
The cultures of normal human primary fibroblast were performed to investigate the effect of β-carotene on cytotoxicity as MTT assay and anti-wrinkle activity as collagen synthesis assays. 1.7 μM of β-carotene was found to be optimal concentration at which 1.4-fold higher amount of collagen was synthesized than that in absence of β-carotene. This indicates that highly
purified β-carotene can be obtained from recombinant E.coli by applying simple method with less toxic solvent and can be used in functional cosmetics as anti-wrinkle agent.

한국어

재조합 대장균으로부터 베타-카로틴을 추출/정제하고 정제된 베타-카로틴의 주름개선 성능을 평가하였다. 탈수 용매, 추출용매에 따른 추출량의 큰 변화는 발견되지 않았으나, wet-cell cake으로부터 추출한 경우가 dry cell로부터 추출한 경우에 비하여 2배 많은 양의 베타-카로틴이 추출되었다. 5 g의 wet-cell cake을 파쇄하고, 아세톤으로 탈수한 후, isobutyl acetate로 추출한 결과 36 mg의 베타-카로틴이 추출되었는데, 이는 61.2% 회수율에 해당한다. 베타-카로틴의 결정을 생성시키고 이를 분리한 결과 순도가 증가하였다. 재조합 대장균 배양액 2.5 L로부터 얻은 wet-cell cake 223 g의 탈수, 세포 파쇄 후 세포잔사물로부터 베타-카로틴 추출, 농축, 결정화 등을 통하여 최종적으로 순도 93%인 베타-카로틴 결정 633 mg을 얻었다.
사람섬유아세포 배양을 통하여 정제된 베타-카로틴의 세포 독성 및 콜라겐 합성에 미치는 영향을 조사하였다. 1.7 μM의 베타-카로틴을 첨가 시 세포에 독성을 거의 나타내지 않았으며 콜라겐 합성양은 첨가하지 않은 경우에 비하여 1.4배 증가하였다. 본 결과는 저 유독성 용매를 사용하고 기존보다 간단한 방법을 사용하여 재조합 대장균으로부터 고순도의 베타-카로틴을 정제할 수 있고 이를 기능성 화장품의 주름개선제로 사용될 수 있음을 시사한다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  균주, 배지, 및 배양 방법
  시료 전처리
  베타-카로틴 추출
  베타-카로틴 순도 측정
  세포독성실험 (MTT-based cytotoxicity assay)
  콜라겐 생합성 실험 (collagen assay)
 분석방법
  결과 및 고찰
  재조합 대장균의 유가식 배양 및 베타-카로틴의 추출·정제
  정제된 베타-카로틴의 주름개선 성능 시험
  요약
 REFERENCES

키워드

저자

• 조지승 [ Ji Song Jo | 경상대학교 생명화학공학과 및 공학연구원 ]
• 구보미 [ Bo Mi Ku | 경상대학교 의과대학 해부학교실 ]
• 강상수 [ Sang Soo Kang | 경상대학교 의과대학 해부학교실 ]
• 이재란 [ Jae Ran Lee | 경상대학교 생명화학공학과 및 공학연구원, ]
• 김유근 [ You Geun Kim | KB코스매틱, ]
• 이학 [ He Lee | 경상대학교 생명화학공학과 및 공학연구원 ]
• 김성배 [ Sung Bae Kim | 경상대학교 생명화학공학과 및 공학연구원 ]
• 김선원 [ Seon-Won Kim | 경상대학교 응용생명과학부 ]
• 정인영 [ In-Young Chung | 광운대학교 전자통신공학과 ]
• 김창준 [ Chang-Joon Kim ] Corresponding author

참고문헌

발행기관

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• 간행물명

  KSBB Journal

• 간기

  격월간

• pISSN

  1225-7117

• 수록기간

  2009~2013

• 십진분류

  KDC 476 DDC 576