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초록

영어

Using recombinant Vaccinia virus(vSC8) that express B-galactosidase, a model heterologous protein, conditions for virus and protein production were investigated in tissue culture flask. As host animal cells HeLa and HeLa S3 were used. It was demonstrated that cells infected during the exponential growth phase gave higher protein yield than those infected during the stationary growth phase and calf serum concentration after virus infection did not significantly alter protein yield. Pretreatment of cell layer with hypotonic solution enhanced the virus infectivity. Optimum cell growth and recombinant protein production was achieved at 37℃. But, during 2 hours of virus infection period incubation temperature must be lowered to 20∼30℃ for maximum recombinant protein yield. To enhance virus replication, the effects of adrenal glucocorticoid hormone (Dexamethasone) and silkworm hemolymph were evaluated. Only dexamethasone increased about 20% of B-galactosidase yield in HeLa S3 cells when added with 10-7∼10-5M concentration 24 hours before infection.

한국어

모델 재조합 단백질인 Bgalactosidase를 발현하 는 Vaccinia virus를 생산하기 위하여 숙주 동물세 포의 배양조건을 관찰한 결과 감염비 5일 경우 H HeLa는 감염후 60시간 후, HeLa 83는 감염후 40 시간 후에 회수할 때 최 대 의 B-galactosidase 수율 을 얻을 수 있으며, 세포가 대수증식기 일 때 감염하 고 배양온도는 37℃ 로 하는 것이 최적 배양조건으로 나타났다. 감염후 혈청의 농도는 단백질 수율에 크 게 영향을 미치지는 않으나 3~5% 에서 가장 높은 단백질 수율을 보였으며, 낮은 이온 농도의 용액으 로 세포층을 세척하는 것과 virus 감염시 온도를 20~∼30℃로 낮추는 것은 Vaccinia-HeLa system에서 감염능 증대 효과를 나타내 였다. Dexamethasone 전처리는 HeLa 83에서 ViruS 복제 증대를 HeLa에 서는 virus 복제 감소를 가져왔다

목차

ABSTRACT
 서론
 재료 및 방법
  세포주 및 바이러스주
  배지, 혈청 및 누에체액
  세포배양 및 바이러스 감염
  Virus 정량(Plaque assay) 및 B-galactosidase activity 측정
 결과 및 고찰
  T-flask에서의 세포 성장
  Virus 증식 조건 최적화(감염비, 혈청농도, 온도, 감염시기 )
  Virus 감염능 증대 실험
  Virus 복제의 증대 실험
 요약
 감사
 참고문헌

저자

• 이두훈 [ Doo Hoon Lee | 동국대학교 공과대학 화학공학과 ]
• 박정극 [ Jung Keug Park | 동국대학교 공과대학 화학공학과 ] Corresponding Author

참고문헌

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• 간행물명

  KSBB Journal

• 간기

  격월간

• pISSN

  1225-7117

• 수록기간

  2009~2013

• 십진분류

  KDC 476 DDC 576