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Rhodotorula glutinis 유래의 고효율 재조합 Epoxide Hydrolase를 이용한 라세믹 Styrene Oxide의 비대칭 광학분할
Asymmetric resolution of racemic styrene oxide using recombinant Escherichia coli harboring epoxide hydrolase of Rhodotorula glutinis

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  • 발행기관
    한국생물공학회 바로가기
  • 간행물
    KSBB Journal KCI 등재 바로가기
  • 통권
    제23권 제5호 (2008.10)바로가기
  • 페이지
    pp.369-374
  • 저자
    박규덕, 최성희, 김희숙, 이은열
  • 언어
    한국어(KOR)
  • URL
    https://www.earticle.net/Article/A102564

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원문정보

초록

영어
The effects of reaction temperature and the addition of various detergents on the enantioselective hydrolysis activity of the recombinant Escherichia coli containing the epoxide hydrolase (EH) gene of Rhodotorula glutinis were investigated for the production of enantiopure styrene oxide. The recombinant E. coli harboring the EH gene from R. glutinis exhibited the enantiopreference toward (R)-styrene oxide with the maximum hydrolytic activity of 165.04 μmol/min/mg of dry cell weight (dcw). The addition of 0.5% (w/v) Tween 20 at 10℃ increased the initial hydrolysis rate and enantioselectivity by 1.45-fold and 2.0-fold, respectively. Enantiopure (S)-styrene oxide was prepared with 99% ee enantiopurity and 46.0% yield (theoretical yield=50%) from 20 mM racemic styrene oxide.
한국어
Rhdotorula glutinis epoxide hydrolase 유전자를 pColdI 벡터와 pET-21b(+) 벡터에 재조합하여 제작한 E. coli를 생촉매로 사용하여 라세믹 styrene oxide에 대하여 회분식 가수분해 반응을 실시하였다. pET-21b(+)/RgEH 재조합 플라스미드 DNA를 가진 E. coli를 15℃에서 저온 배양할 때 수용성 단백질 형태로 가장 많이 발현되었고, 입체선택적 가수분해 활성과 촉매 안정성이 가장 좋았다. 라세믹 tyrene oxide 20 mM에 대하여 반응온도 30℃에서는 반응시간 20분 동안에 수율 24.0%로 (S)-styrene oxide를 얻은 반면에, 반응온도를 10℃로 낮추고 0.5% (w/v) Tween 20을 첨가하고 반응시키면 광학순도 99.0% ee 이상의 (S)-styrene oxide을 46.0%의 수율로 얻을 수 있었다. 최적조건에서 E 값은 6.68이었으며, 100 mM의 라세믹 styrene oxide에 대해서는 반응시간 50분에 이론 수율 50% 대비 40%의 높은
수율로 (S)-styrene oxide를 얻을 수 있었다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  재료
  pColdⅠ 벡터용 R. glutinis EH의 발현 시스템 구축
  세포 배양조건
  R. glutinis EH 유전자 재조합 E. coli의 styrene oxide에대한 가수분해능 평가
  저온 배양한 pET-21b(+)/RgEH 유전자 재조합 E. coli의광학활성 styrene oxide 생산 조건의 최적화
  재조합 E. coli의 광학 분할 속도의 동역학적 상수 결정
 결과 및 고찰
  R. glutinis epoxide hydrolase 유전자의 발현 시스템구축 및 단백질 발현 특성평가
  R. glutinis EH 유전자 재조합 E. coli의 styrene oxide에대한 가수분해반응 평가
  저온 배양한 pET-21b(+)/RgEH 유전자 재조합 E. coli를이용한 광학활성 styrene oxide의 생산
  고농도 라세믹 styrene oxide의 광학분할
  재조합 R. glutinis EH 생촉매를 이용한 광학활성 styreneoxide 생산을 위한 반응조건 최적화
 요약
 REFERENCES

키워드

enantioselective hydrolysis epoxide hydrolase Rhodotorula glutinis enantiopure (S)-styrene oxide

저자

  • 박규덕 [ Kyu Deok Park | 경성대학교 공과대학 식품생명공학과 ]
  • 최성희 [ Sung Hee Choi | 경성대학교 공과대학 식품생명공학과 ]
  • 김희숙 [ Hee Sook Kim | 경성대학교 공과대학 식품생명공학과 ]
  • 이은열 [ Eun Yeol Lee | 경희대학교 환경․응용화학대학 화학공학과 ] Corresponding author

참고문헌

자료제공 : 네이버학술정보

간행물 정보

발행기관

  • 발행기관명
    한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
  • 설립연도
    1984
  • 분야
    공학>생물공학
  • 소개
    이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동

간행물

  • 간행물명
    KSBB Journal
  • 간기
    격월간
  • pISSN
    1225-7117
  • 수록기간
    2009~2013
  • 십진분류
    KDC 476 DDC 576

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