Zoogloea ramigera 115의 Zooglan Gene Cloning
Zoolan Gene Cloning of Zoogloea ramigera 115
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- 발행기관
- 한국생물공학회 바로가기
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- 간행물
- KSBB Journal 바로가기
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- 통권
- 제11권 제1호 (1996.02)바로가기
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- 페이지
- pp.115-123
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- 저자
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- 언어
- 한국어(KOR)
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- URL
- https://www.earticle.net/Article/A102455
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원문정보
초록
- 영어
- Two kinds of mutants were isolated to clone a cluster of genes essential for zooglan biosynthesis. Zoogloea ramigera 115 strains produce capsular polysaccharide. To achieve conjugation in strain 115 and to facilitate recovery of product, a capsule non-forming strain was isolated via successive centrifugation and screening. The other kind of mutants devoid of or producing altered exopolysaccharides were obtained using classical transposon(Tn5) technique and screened for altered colony morphology and celluflour binding properties. Complementation of these mutants was achieved with Z. ramigera 115 slime gene library constructed in a broad host range cosmid vector and helper plasmid by triparental conjugation.
- 한국어
- zooglan생합성에 필수적인 gene cluster를 clone하기 위해 2종류의 변이주가 분리되었다. Zoogloea ramigera 115는 협막형 다당(주로 zooglan)을 생산한다. 115 균주로 접합시키고 생산물을 용이하게 분리하기 위하여 반복된 원심분리와 선별을 통해 협막을 만들지 않는 slime형 생산균주를 분리하였다. 세포외 다당 생산 능력이 결여된 변이주를 전통적인 transposon(Tn5) 기술을 사용하여 얻었고 달라진 colony 형태와 celluflour결합 성질에 의해 선별하였다. 이들 변이주들은 범용숙주범위 cosmid vector안에 건설된 Z.ramigera 115slime gene library 와 helper plasmid로의 3양친 접합에 의해 보상되었다.
목차
ABSTRACT
서론
재료 및 방법
박테리아 균주와 plasmid
배지와 배양 조건
제한효소와 시약
Zoogloea ramigera 다당합성 gene의 cloning 방안
Zoogloea ramigera 115(ATCC 25935)로부터 slime헝의 선발
다당 생합성이 결여된 변이주의 선발
Southern hybridization에 의한 Tn5 삽입 확인
Zooglbea ramigera 115slime'의 genomic DNA의 분리 및 partial digestion
Gel elutor에 의한 DNA 회수
pLAFR3의 제한효소 처리 및 탈인산화
Ligation과 in vitro packaging
E. coliHB 101로의 transfection
다당 생합성 결여 변이주와 genomic library와의 complementation
결과 및 고찰
Zoogloea ramigera 115로부터 115slime'의 분리 및 특성
Celluflour에 대한 반응이 다른 변이주의 분리
Southern blotting of Tn5
Zoogloea ramigera 115slimer의 genomic DNA의 분리
다당생합성 결여 변지주와 genomic Iibrary와의 comolementation
재조합된 cosmid DNA의 분리 및 제한효소 처리
요약
감사
참고문헌
저자
간행물 정보
발행기관
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- 발행기관명
- 한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
- 설립연도
- 1984
- 분야
- 공학>생물공학
- 소개
- 이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다 1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력 2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동 3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최 4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간 5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의 6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동
간행물
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- 간행물명
- KSBB Journal
- 간기
- 격월간
- pISSN
- 1225-7117
- 수록기간
- 2009~2013
- 십진분류
- KDC 476 DDC 576
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