0.374(1/day) of specific growth rate and 0.435(mg/108 viable cells) of Anti-Microbial factor (AMF) productivity were obseaved for the batch cultivation of human promyelocytic cells in 10% serum containing medium. The crude protein was purified 10 folds by a serial purification steps of ion exchange chromatography, Bio-Rex 70 and gel filtration chromatography, Sephadex G-70 and 100. The ranges of MIC(Minimal Inhibitory Concentration) of commercially available antibiotics, penicillin G, streptomycin and ampicillin was estimated as 40 to (70ug/ml) on Gram (-) E. coli and Gram (+) Streptococcus aureus. The values of the MBC (Minimal Bactericidal Concentration) of Purified AMF was (0.5ug/ml) and 0.4(ug/ml), respectively. The molecular weight of the AMF was estimated as 15,000 dalton by SDS-PAGE.
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본 실험에서는 인간 전과립 세포를 회분배양 조건 에서 10%의 혈청을 포함하는 배지로 배양하였다. 이 와같은 조건에서 세포의 비성장율은 0.374C1/day) 이고 세포내 존재하는 살균활성을 가진 목적 단백질 의 생산성은 0.435(mg/10' viable cells)으로 나타났 다. 세포내 존재하는 목척 단백질의 순수 분리를 위 해 sephadex G-75, sephadex G-100, Bio→Rex70 을 이용해 분리하였다. 정제된 목적 단백질은 감수성 균주, E. coli IFO 13168과 St. aureus IFO 3060 을 표준 균주로 살균 측정을 하였을 때, 기존의 항생 물질은 균주에 대해 40~701땅1m!에서 활성을 나타 낸 반면, 정제된 목적 단백질은 G(+)균(St. aureus IFO 3060)에서는0.5ug /ml이고, G(-)균(E. coli IFO 13168)에서는0.4ug/ml에서 살균 활성을 보였다. 따라서 AMF가 기존 항생물질보다 살균 활성이 강력한 단백질임을 알 수 있다. 해당 분자량을 측정 하기 위해 SDS-PAGE로 측정한 결과 약 15,000 Dalton의 분자량을 갖고 있음이 확인됐다.
목차
ABSTRACT 서론 실험재료 및 방법 세포주 및 배양 조건 추출 및 정제 AMF의 분리 및 정제 AMF의 항균 활성 측정 결과 및 고찰 요약 감사 참고문헌
저자
박영식 [ Young-shik Park | 강원대학교 식품공학과 ]
김태호 [ Tae-Ho Kim | 강원대학교 식품공학과 ]
안주희 [ Joo-Hee Ahn | 강원대학교 식품공학과 ]
함문선 [ Moon-Sun Ham | 강원대학교 식품공학과 ]
김현구 [ Hyeon-Goo Kim | 강원대학교 식품공학과 ]
전병철 [ Byung-Cheol Jeon | 삼일제약 중앙연구소 ]
H. Murakami [ 일본 구주대학 세포배양실험실 ]
이현용 [ Hyeon-Yong Lee | 강원대학교 식품공학과 ]
Corresponding Author
한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
설립연도
1984
분야
공학>생물공학
소개
이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다
1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력
2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동
3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최
4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간
5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의
6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동