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초록

영어

We used electrospary ionization ion trap tandem mass spectrometry (ESI-IT tandem MS) to structural elucidation of three different biantennary-type glycans having zero, one, two galactoses (G0, G1, G2). The highest fragment ion in the MS/MS spectra of three glycans was produced by 0,2-ring cleavage of fucose-linked N-acetylglucosamine (GlcNAc) in reducing end.
The fragment ions both from precursor ions and 0,2-ring cleaved ions (0.2An; n=5 for G0, n=6 for G1 and G2) were not overlapped each other. As results of MSn analyses, tandem fragmentation trees of each glycans were generated and 2,4-ring cleavages (2,4A6) were occurred in GlcNAc linked to reducing end GlcNAc. This structural elucidation and fragmentation study of N-linked glycans by tandem mass spectrometry can be applied to structural analysis of more complicated glycans.

한국어

본 연구에서는 전극분무 이온화-이온 포획 질량 분석기를 이용하여 인체 IgG의 N-연결 글라이칸 중 이중촉각 구조를 가지면서 비환원 말단의 갈락토오즈 개수가 0, 1, 2개인 서로 다른 세 가지 글라이칸의 단일 쪼개짐 (MS/MS) 및 다중 쪼개짐 현상을 관찰하고 이를 구조 분석에 이용하였다. MS/MS 분석에서는 퓨코오즈가 결합된 환원 말단의 N-아세틸 글루코사민의 0,2-고리 쪼개짐으로 파생되는 조각 피크가 가장 높은 세기로 나타나는 것을 관찰할 수 있었고, 전구체 피크와 별개로 연속적인 당 단위체의 쪼개짐이 일어나는 것을 알 수 있었다. 또한 G1 글라이칸의 경우에서만 비환원 말단의 갈락토오즈와 N-아세틸글루코사민이 결합된 채 쪼개지는 현상이 일어나는 것을 관찰할 수 있었다. 다중 쪼개짐 질량 분석 기법을 이용하여 MS/MS 스펙트럼에서 나타나는 조각 피크들의 구조를 재확인할 수 있었고, 이를 트리 구조로 정리할 수 있었다.
또한 추가적인 2,4-고리 쪼개짐 현상이 환원 말단 하나 바깥쪽의 N-아세틸 글루코사민에서 공통적으로 일어나는 것을 관찰할 수 있었다. 이와 같은 다중 쪼개짐 질량 분석기법을 이용하여 보다 복잡한 구조의 글라이칸 구조 분석에 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  효소를 이용한 IgG로부터 N-glycan의 이탈 반응
  매트릭스 보조 레이저 탈착/이온화 질량 분석기 방법
  전극분무 이온화 질량 분석기 방법
 결과 및 고찰
  매트릭스 보조 레이저 탈착/이온화 질량분석기와 전극분무 이온화 질량분석기를 이용한 IgG의 N-연결 글라이칸 프로파일링
  전극 분무 이온화 질량 분석기 (ESI-MS)를 이용한MS/MS 분석
  다중 쪼개짐 질량 분석법을 이용한 N-글라이칸의 구조 해석
 요약
 REFERENCES

키워드

저자

• 주황수 [ Hwang-Soo Joo | 서울대학교 공과대학 화학생물공학부 ]
• 김윤곤 [ Yun-Gon Kim | 서울대학교 공과대학 협동과정 생물화학공학 전공 ]
• 장경순 [ Kyoung-Soon Jang | 서울대학교 공과대학 협동과정 생물화학공학 전공 ]
• 김병기 [ Byung-Gee Kim | 서울대학교 공과대학 화학생물공학부, 서울대학교 공과대학 협동과정 생물화학공학 전공 ] Corresponding author

참고문헌

발행기관

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• 간행물명

  KSBB Journal

• 간기

  격월간

• pISSN

  1225-7117

• 수록기간

  2009~2013

• 십진분류

  KDC 476 DDC 576