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초록

영어

A flow injection analysis(FIA) system was developed for the determination of cholesterol using immobilized cholesterol oxidase and cholesterol ester hydrolase. The enzymes were immobilized on controlled pore galas(CPG) by the glutaraldehyde method. The glass colunms packed with immobilized enzymes were found to contain 3-5 I.U. for each enzyme. A hydrogen peroxide sensitive electrode was contructed and applied to the FIA system. The operational conditions for FIA response were investigated and optimized with variation of sampling volume, flow rate and composition of carrier solution. The FIA response were linear upto 60 and 400mg/m1 for free cholesterol and cholesterol ester, respectively. All samples were analyzed with a good precision (<2.5% CV) and accuracy. 23 samples were mea sured succesively within about an hour. Intermittent assays of more than 500 times caused 50% decrease in response sensitivity.

한국어

고정화 효소를 이용하여 콜레스테롤을 신속, 정확 하게 측정할 수 있는 Flow injection analysis(FIA) 시스댐을 개발하였다. 콜레스테롤 산화효소와 콜레 스테롤 에스테르 가수분해효소를 cantrall어 pore g glass과 glutaraldehyde를 사용해 얻어진 고정화 효 소를, 유리관에 충진해 얻어진 컬럼은 약 3-5 I. U. 의 활성을 나타내였다. 백금을 이용해 구성된 전극 은 +600mV에서 효소반응 결과 생성된 과산화수소 에 대해 특이적으로 응답하였다. 구성되어진 FIA시 스템의 분석능을 향상시키기 위하여 시료량, 캐리어 용액의 유속과 조성 풍의 변화에 따른 응당올 조사 하였다. 최적화된 운영조건하에서 유리 콜레스테롤 과 콜레스테롤 에스테르 표준용액에 대한 응답은 각 각 60, 400mg/ml까지 선형성(r=0.994 빛 0.998) 을 나타내였다. 모든 시료의 분석은 정확, 정밀( <2. 5 5%)한 것으로 조사되었다. 시간당 23회의 분석이 가능하였고, 500회의 간혈분석 후에 응답감도가 약 반으로 감소하였다.

목차

ABSTRACT
 서론
 재료 및 방법
  시약
  표준용액의 제조
  효소의 고정화
  과산호수소 특이 전극과 Flow-through cell의 제작
  FIA시스템의 구성
  자료 처리
  기타 분석방법
 결과 및 고찰
  CPG의 효소 결합능력과 활성 회수율
  전극간 전위차의 결정
  Flow-through cell에서 전극응답에 대한 시료량의 영향
  Flow-through cell에서 전극응답에 대한 유속의 영향
  응답에 대한 Triton X-100의 영향
  캐리어 용액의 유속에 따른 응답의 변화
  콜레스테롤에 대한 Calibration curves
  분석의 정밀성(precision)과 정확성(accuracy)
  그외의 고찰
 요약
 참고문헌

저자

• 신민철 [ Min-Chol Shin | 한국과학기술원 생물공학과 ]
• 김학성 [ Hak-Sung Kim | 한국과학기술원 생물공학과 ]

참고문헌

발행기관

간행물

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• 간행물명

  KSBB Journal

• 간기

  격월간

• pISSN

  1225-7117

• 수록기간

  2009~2013

• 십진분류

  KDC 476 DDC 576