High Frequency Electroporation-transformation of Coryneform Bacteria Grown in the Medium with Penicillin-G
Penicillin-G 첨가 배지에서 배양한 코리네형 세균의 전기장 충격법에 의한 고효율 형질전환
Kap-Soo Noh, Seong-Jun Kim, Hyune-Hwan Lee, Hyung-Hwan Hyun, Jae-Heung Lee
언어
영어(ENG)
URL
https://www.earticle.net/Article/A101929
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원문정보
초록
영어
Using the shuttle vector pECCGl between Escherichia coli and Corynebacterium glutamicum and C. glutamicum strain JS231 grown in the medium supplemented with penicillin-G, which inhibits the formation of cross-links in the peptidoglycan of bacterial cell wall, various parameters involved in electroporation system including resistance, electric field strength, capacitance, DNA concentration, and cell density were investigated independently and optimized for the high efficiency transformation of coryneform bacteria. Using cells grown with 0.3U/ml of penicillin-G and harvested at A600 of 0.7-0.8, transformation efficiencies of 107-l08 transformants/ug of DNA with Corynebcctertum glutamicum strain JS231 and wild type ATCC13032 were achieved under conditions of 12.5kV/cm of electric field strength, 400 ohms of resistance, 25uF of capacitance, 3108 cells per transformation(1.21010 cells/ml) and 100ng of plasmid DNA per transformation.
목차
ABSTRACT INTRODUCTION MATERIALS AND METHODS Bacterial strains and plasmids Media and bacterial cultivation Plasmid DNA preparation and DNA manipulations Electroporation equipment and electroporation procedure RESULTS Optimization of conditions for C. glulamicum electroporation Resistance : Electric field strength : Capacitance : DNA concentration : Cell density : DISCUSSION ABBREVIATIONS ACKNOWLEDGMENT 요약 REFERENCES
한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
설립연도
1984
분야
공학>생물공학
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6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동