Covalent modification of a protein with polyethylene glycol (PEG) has become one of the most widely used and well established drug enhancement strategies in the biopharmaceutical industry. The general benefits enjoyed by PEGylation, such as prolonged serum half-lives or reduced immunogenicity in vivo, are well known. By now the PEGylation process has been performed with purified proteins, and it is required to recover the desired PEGylate by a multi-step purification process. The ultimate aim of our research is to develop an integrated process of PEGylation and in vitro refolding starting with inclusion body material. For this, we investigated the feasibility that a protein could be PEGylated under a denaturing condition and also the PEGylated proteins could be refolded correctly. Using lipase as a model protein, we found that it was PEGylated in the presence of 8 M urea and that the PEG molecules covalently attached to lipase did not appear to hinder its refolding.
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변성제 (urea)와 환원제에 의해 완전히 풀린 상태의 lipase도 PEG에 의해 수식되는 것을 관찰하였다. 또한 mPEGaldehyde로 수식된 mono-PEGylate과 di-PEGylate을 변성제와 환원제를 이용해 unfolding 시킨 후 희석에 의한 재접힘 시킨 결과, lipase에 공유결합된 PEG 분자는 재접힘 수율에 거 의 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 따라서 내포체 단백질을 대상으로 변성된 상태에서 PEGylation시킨 후 in vitro 재접힘 공정을 통해 PEGylation된 상태의 재생된 단백질을 회수할 수 있는 통합공정의 타당성을 제시하였다.
목차
Abstract 서론 재료 및 방법 플린 Lipase의 PEGylation과 분리 PEGylation된 lipase의 in vitro 재접합 결과 및 고찰 변성 버퍼 상에서 플린 lipase의 PEGulation PEGulation lipase의 in vitro 재접합 요약 REFERENCES
키워드
PEGylated lipasePEGylationrefoldingintegrated process
저자
김민영 [ Min Young Kim | (주)한미제약 연구센터 ]
권진숙 [ Jin Sook Kwon | 한양대학교 화학공학과 생물공정연구실 ]
이은규 [ Eun Kyu Lee | 한양대학교 화학공학과 생물공정연구실 ]
Corresponding author
한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
설립연도
1984
분야
공학>생물공학
소개
이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다
1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력
2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동
3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최
4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간
5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의
6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동