Glycine 첨가에 의한 Pseudomonas aurantiaca S-4380 유래 재조합 levansucrase 효소의 세포 외 분비촉진 효과
Effect of Glycine Supplement on Extracellular Secretion of Levansucrase from Pseudomonas aurantiaca S-4380 in Recombinant Escherichia coli
The addition of glycine up to 0.5% (w/v) to Luria broth (LB) media on the secretion of levansucrase in a recombinant strain Escherichia coli JM109/pUPLK1 was observed to enhance the release of periplasmic proteins from the cell to the broth, without significantly affecting the cell growth rate and protein productivity. However, the glycine concentration at 1% (w/v), the cell density attainable at the stationary phase fell to about 50% and the extracellular activity of levansucrase corresponded to about 80% of the total (extracellular plus intracellular) activity and increased by 2.6-fold, comparing to the cells grown in the absence of glycine. The increased pH at stationary phase accelerated the degradation of levansucrase. Maximal extracellular activity was attained when 1% glycine was supplemented at the onset of strain growth.
한국어
Glycine의 배양액 첨가에 의해 Pseudomonas aurantiaca S-4380 유래 재조합 levansucrase의 세포 외 분비가 촉진된다는 것을 알 수 있었다. 배지액에 존재하는 glycine 농도에 비례 의존적으로 균체 내에서 발현된 효소의 분비량이 증가되었고, 세포의 성장은 억제됨을 알 수 있었다. SDS-PAGE 분석결과 0.5%, 1.0% glycine 첨가로 배양시간이 증가하면서 세포내의 단백질 배양액으로 분비됨을 알 수 있었다. Levansucrase를 분비시키기 위한 최적화된 조건은 pH을 6.9-7.0으로 조절하면서 1.0% glycine을 배양초기 첨가하였을 때 배양말기에 단백질의 급격한 분해 없이 145 U/mL의 효소 활성도를 나타내었다.
목차
Abstract 서론 재료 및 방법 균주 및 배지조성 배양방법 분석방법 결과 및 고찰 Glycine의 농도별 첨가가 균체성장에 미치는 영향 Levansucrase의 균체외 분비 균체 성장시기에 따른 glycine 첨가 효과 Induction 효과 Levansucrase 생성과 균체외 분비를 위한 배양조건의최적화 요약 REFERENCES
키워드
glycinelevansucraseextracellularsupplement
저자
김승환 [ Seung-Hwan Kim | (주) 리얼바이오텍 ]
Corresponding author
한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
설립연도
1984
분야
공학>생물공학
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