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Lactobacilli have been considered to play important roles in the health of human vagina. They secrete inhibitory substances to prevent vaginal infection by pathogenic organisms. In a previous study, we have isolated several lactobacilli from Korean woman and one of them (KLB46) was selected and indentified as Lactobacillus crispatus which showed high antimicrobial activity. In this study, cold adaptation prior to subsequent stresses exposure was examined whether L.
crispatus KLB46 maintain the viability better than the non-adapted cells under stresses. For pharmaceutical formulation, the lyophilization process is required where stresses such as freezing/thawing and dehydration are routinely applied. Formulated L. crispatus KLB46 can be used for ecological treatment of bacterial vaginosis. The response of cold adapted cells to other
environmental stresses such as acid, heat, ethanol, NaCl, and H2O2 was also examined. The results showed that coldadapted cells maintained higher survival rate compared with the non-adapted cells (freezing-thawing, 3-folds; dehydration; 3-folds; acid, 3-folds; heat, 10-folds). However, we did not observe any positive effect of cold adaptation on other stresses such as ethanol, NaCl and H2O2. When chloramphenicol was added during cold adaptation, adaptation effect was abolished. This confirms that de novo protein synthesis is necessary during the adaptation process. Moreover, we have identified cold shock protein homolog that codes for a major cold shock protein by PCR amplification using degenerate primers.

한국어

본 연구에서는 L. crispatus KLB46을 저온 전처리함으로서 제제화 과정에 받게 되는 얼림과 녹임, 건조 스트레스뿐만 아니라, 여러 다른 환경 스트레스에 대한 내성이 증진된다는 것을 확인하였다. 그리고 내성 증진에 신규 단백질 합성이 필요함을 확인하였으며 나아가, 저온 충격 유전자(csp)를 확인하였다. 따
라서 이 균주를 제제화 하기 위한 방법으로 저온 전처리를 이용할 경우 생균력 유지에 큰 효과를 얻을 수 있다고 사료된다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  사용 균주 및 배지
  저온 전처리 조건
  얼림/녹임 및 건조 스트레스 실험
  환경 스트레스(산, 열, 에탄올, 염, 과산화수소) 실험
  PCR를 통한 cspA 확인
 결과 및 고찰
  전처리 최적 조건과 얼림/녹임 및 건조 스트레스에 대한 전처리 효과
  Chloramphenicol 처리시 저온 전처리 효과 저해
  산 스트레스에 대한 저온 전처리 효과
  열 스트레스에 대한 저온 전처리 효과
  에탄올, 삼투압, 산화적 스트레스에 대한 저온 전처리 효과
  PCR를 통한 cspA gene 확인
 요약
 REFERENCES

키워드

저자

• 김주현 [ Joo Hyun Kim | 인하대학교 생물공학과, 초정밀 생물분리기술연구센터 ]
• 이석용 [ Suk-Yong Lee | 인하대학교 생물공학과, 초정밀 생물분리기술연구센터 ]
• 장정은 [ Chung Eun Chang | 인하대학교 생물공학과, 초정밀 생물분리기술연구센터 ]
• 김승철 [ Seung-Cheol Kim | 이화여자 대학교 의과대학 산부인과학교실 ]
• 윤현식 [ Hyun Shik Yun | 인하대학교 생물공학과, 초정밀 생물분리기술연구센터 ]
• 소재성 [ Jae-Seong So | 인하대학교 생물공학과, 초정밀 생물분리기술연구센터 ]

참고문헌

발행기관

간행물

표지보기 관심저널 등록

• 간행물명

  KSBB Journal

• 간기

  격월간

• pISSN

  1225-7117

• 수록기간

  2009~2013

• 십진분류

  KDC 476 DDC 576