AOT 역미셀을 이용한 α-chymotrypsin의 가용화에 대한 연구 ; pH와 염의 영향
A Study on the Solubilization of α-Chymotrypsin Using AOT Reverse Micelles ; Effects of pH and salts
Micellar aggregates are known to be useful for the selective isolation of biologically active materials such as amino acids, proteins, and enzymes from crude mixtures sparsely dispersed in water. In this study, the effects of pH, salt type and its concentration on the solubilization of α-chymotrypsin into the organic micellar phase, which consisted of AOT (sodium di(2-ethylhexy)sulfosuccinate) and iso-octane, were comprehensively examined. It was found that maximum extraction efficiency was attained at a pH below the isoelectric point of α-chymotrypsin; at pH=5.0 for NaCl and KCl, and at pH=7.0 for CaCl2 and MgCl2. In order to avoid complications stemming from the precipitation of protein at low pH interfaces, the protein concentrations in the organic and aqueous phases were directly measured. The size of the micelle water pool was estimated by measuring the molar ratio of the surfactant to the water, W0. The resulting values of W0 were nearly constant at 30 and 19 for NaCl and KCl, respectively, and were independent of pH. The addition of 1:2 salts like MgCl2 and CaCl2 led to much lower, but a constant value of, W0 than the 1:1 salts.
한국어
미셀 집합체들이 수용액에 존재하는 혼합물로부터 아미노산, 단백질, 그리고 효소와 같은 생물학적 물질의 선택적인 추출에 유용하게 사용될 수 있음은 널리 알려져 있다. 본 연구에서는 가용화 과정에 영향을 미치는 변수들을 확인하기 위하여 AOT와 iso-octane의 유기상에서의 α-chymotrypsin 가용화에 대하여 pH의 영향, 염의 종류와 염의 농도의 영향을 연구하였다. NaCl과 KCl에 대하여서는 pH=5.0에서 최대 효율을 나타내며, MgCl2와 CaCl2에 대해서는 pH=7.0에서 최대효율을 나타내었는데 이와 같은 조건은 모두 α-chymotrypsin의 등전점 이하 영역이다. 낮은 pH에서는 계면에 단백질이 광범위하게 침전되거나 엉킴현상이 나타나기 때문에 유기상에서의 단백질 농도를 직접 측정하여 실험오차를 줄였다. 미 셀의 water pool 크기는 물에 대한 계면활성제의 몰 비(W0)를 측정하여 추산하였다. 1:1염인 NaCl과 KCl에 대하여 W0값은 각각 30과 19로 거의 일정하고 MgCl2와 CaCl2의 1:2염에 대하여서는 1:1염의 W0값보다 훨씬 작은 5 이하의 값을 나타내었다.
목차
Abstract 서론 재료 및 방법 재료 및 시약 실험 분석 결과 및 고찰 pH에 대한 영향 염 농도에 대한 영향 계면에서의 침전 역미셀의 크기 요약 REFERENCES
키워드
solubilizationreverse micelleAOTα-chymotrypsin
저자
노선균 [ Seon-Gyun Rho | 전남대학교 공과대학 화학공학과 ]
강춘형 [ Choon-Hyoung Kang | 고분자기술연구소 ]
Corresponding author
한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
설립연도
1984
분야
공학>생물공학
소개
이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다
1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력
2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동
3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최
4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간
5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의
6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동