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초록

영어

A fusion protein of human interleukin-2(hIL-2) and glucagon, which was expressed in Escherichia coli., was digested with enterokinase for recovery of hIL-2 from the fused protein. To obtain hIL-2 of optimum recovery, hydrolysis reaction were performed under various conditions of urea, additives and reaction time. hIL-2 was finally purified by RP-HPLC(reversed phase-HPLC) to remove cleaved G3 fusion partner and residual uncleaved G3-IL-2. hIL-2 was eluted in a single peak at 100% acetonitrile at 28 min. Optimum urea concentration was found to be 0.5 M and 24 h reaction time was sufficient without any additive such as CaCl2 and Tween-20.

한국어

Enterokinase에 의한 G3-IL-2 가수분해 반응에 있어서의 urea는 글루카곤과 IL-2를 분리하고자 하는 데에 필요한 절단 부위가 잘 노출되도록 도움을 주는 역할을 하는데 1.0 M이상의 높은 농도에서 오히려 원하는 단백질의 변성에 영향을 미침을 알 수 있었다. 그리고 효소 반응 시에 효소의 활성에 도움을 주는
첨가제는 반응 후에 침전이 생기고, IL-2의 회수율에는 오히려 나쁜 영향을 주었다. 그리고 반응시간에 따른 반응의 효과는 24시간 이후에는 효소에 의한 가수분해 반응이 진행되지 않음이 관찰되었다. 가수분해 반응 후의 순수한 IL-2의 회수율은 약 15～35% 정도였고, 반응 조건에 따라 수율은 차이가 있었다.
IL-2는 시간이 지남에 따라 분자 상호 간의 응집에 의해 oligomer의 형태가 되어 본래의 크기보다 더 커져 RP-HPLC에서 더 빨리 용리되는 결과를 얻을 수 있었다.

목차

Abstract
 서론
 재료 및 방법
  G3-IL-2의 정제
  Enterokinase 용해
  Enterokinase 효소 반응
  Reversed-phase HPLC (RP-HPLC)
 결과 및 고찰
  Enterokinase 효소 반응
  Proleukin의 시간에 따른 RP-HPLC 피크의 변화
  Urea의 농도의 영향
  첨가제의 영향
  반응시간의 영향
  요약
 REFERENCES

키워드

저자

• 이운영 [ Woon-Young Lee | 충남대학교 공과대학 화학공학과 ]
• 이지원 [ JeeWon Lee | 생명공학 연구소 ]
• 김인호 [ In-Ho Kim | 충남대학교 공과대학 화학공학과 ] Corresponding author

참고문헌

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• 간행물명

  KSBB Journal

• 간기

  격월간

• pISSN

  1225-7117

• 수록기간

  2009~2013

• 십진분류

  KDC 476 DDC 576