Here we describe a useful method for the site-directed immobilization of proteins with a DNA-binding domain (DNA-BD) on the cognate DNA-coated gold surface for surface plasmon resonance (SPR) imaging analyses. In order to assess the performance of this procedure, we utilized two DNA-BDs, yeast GAL4 DNA-BD, and bacterial LexA DNA-BD. After the immobilization of the cognate double-stranded DNAs (dsDNAs) to a gold chip surface with a monolayer of poly(L-lysine) for sequence-specific DNA-protein interaction, purified recombinant GAL4 DNA-BD:EGFP and LexA DNA-BD:RFP fusion proteins were applied to a dsDNA-spotted gold chip, and were subsequently analyzed using an SPR imaging system. Consequently, the recombinant DNA-binding proteins, GAL4 DNA-BD:EGFP and LexA DNA-BD:RFP, were shown to bind selectively to their cognate DNA sequences on the gold chip. Collectively, our results revealed that sequence-specific dsDNA microarray approach might prove useful in performing the site-directed immobilization of DNA-binding proteins onto a gold thin film in a parallel format.
한국생물공학회 [The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering]
설립연도
1984
분야
공학>생물공학
소개
이 법인은 생물 공학의 발전과 보급에 이바지하고, 회원 상호 간의 연구 협력과 친목을 도모함을 목적으로 한다
1. 생물공학 분야의 발전을 위한 연구 협력
2. 생물공학의 실용화를 촉진시키기 위한 산학 협동
3. 학술연구 발표회, 강연회, 연수회 등 학술활동의 개최
4. 국,영문 학술지,소식지,학술회의 Proceedings 및 학술도서의 발간
5. 생물공학 발전을 위한 정책 건의
6. 기타 국제 교류 등 본 학회의 목적 달성을 위한 제반 활동